IFN-Yelisa檢測試劑盒試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被人谷氨酰半*連接酶催化亞基捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、標記的檢測抗體，經過溫育并*洗滌。用底物顯色，在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人谷氨酰半*連接酶催化亞基呈正相關用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL； 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。 每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
