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γδT細胞高效擴增試劑盒

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

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更新時間:2019-06-11 15:16:35瀏覽次數(shù):672次

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產(chǎn)品簡介

γδT細胞高效擴增試劑盒 γδT細胞具有在體內(nèi)快速反應的特性,在受到刺激時,會先于αβ-T細胞釋放促炎性細胞因子(IFN-γ和TNF-α等)。

詳細介紹

γδT細胞高效擴增試劑盒產(chǎn)品簡介

γδT細胞具有在體內(nèi)快速反應的特性,在受到刺激時,會先于αβ-T細胞釋放促炎性細胞因子(IFN-γ和TNF-α等)。  γδT細胞能夠激活NK細胞的腫瘤細胞毒作用,與DC細胞互刺激成熟, APC細胞抗原呈遞的功能,激活αβ-T 細胞的免疫效應, γδT細胞的殺傷作用具有非MHC限制性,廣泛的殺瘤譜,已知對至少十幾種腫瘤細胞有殺傷作用。 γδT細胞在人外周血含量很少(1-5%),本產(chǎn)品能夠?qū)⑼庵苎械膯蝹€核細胞大規(guī)模擴增成γδT細胞,具有擴增效率高,目的細胞百分比高的特點,起始單個核細胞經(jīng)過14天培養(yǎng),總細胞數(shù)可以擴增約50-100倍左右,γδT細胞數(shù)可以擴增500-1000倍,其純度高于85%,并且全程無血清培養(yǎng),為基礎和臨床研究使用γδT細胞提供 一個有力的武器。

γδT細胞高效擴增試劑盒產(chǎn)品特點

1 擴增效率高:起始單個核細胞經(jīng)過14天培養(yǎng),總細胞可以擴增約50-100倍左右,目的細胞(γδT細胞)數(shù)可以擴增500-1000倍;

2 目的細胞百分比高: γδT細胞純度可以達到85%以上;

3 全程無血清培養(yǎng)。 

試劑盒成份

使用說明

1 在血液采集前一天將100μL GD-I試劑加入4mL PBS,包被于T-75瓶,用錫紙包好,平放于4°C冰箱過夜;

注意: 確保T-175瓶平放以保證含有GD-I試劑的PBS溶液能夠均勻分布于T-75瓶底。

2 D0 用PBS溶液洗滌前一天包被的T-75瓶一次,將制備好的單個核細胞(MNC)按0.5-1M/mL細胞密度鋪于洗滌后的T-75瓶中,加入GD-IV 47.5mL, GD-II 85μL,GD-III 2.5mL以及IL-2 1000U/mL;

注意:1)洗滌時用移液管吸取20ml PBS注入T-75瓶,輕微震蕩后倒出/吸出,切忌用沖力較大的移液器或移液槍反復沖洗以免破壞包被面;

2)本試劑盒所配試劑均為整支加入,可先用移液槍移取試劑管中試劑后再用培養(yǎng)基沖洗試劑管確保管內(nèi)剩余試劑能夠充分利用。

 3)D3 補加90mL GD-IV(含IL-2 1000U/mL)和10mL GD-III,轉入細胞培養(yǎng)袋,此時袋子含150mL培養(yǎng)基;

4 )D5 往培養(yǎng)袋補加135mL GD-IV(含IL-2 1000U/mL)和15mL GD-III,此時袋子含300mL培養(yǎng)液;

5 )D7 往培養(yǎng)袋補加270mL GD-IV(含IL-2 1000U/mL)和30mL GD-III,此時袋子含600mL培養(yǎng)液;

 6 )D9 每個培養(yǎng)袋補加460mL GD-IV(含IL-2 1000U/mL)和40mL GD-III,此時袋子含1100mL培養(yǎng)液;

注意: 確保T-175瓶平放以保證含有GD-I試劑的PBS溶液能夠均勻分布于T-75瓶底。

 7 )D12-14 收獲γδT細胞。

培養(yǎng)效果

 

培養(yǎng)細胞14天后,細胞總數(shù)及目的細胞(γδ T cell)擴增倍數(shù)以及流式表型分析(N=4)

產(chǎn)品保存

1 本產(chǎn)品需避光保存;

2 GD-I,GD-IV置于2-8°C保存,有效期為12個月,其它成份包括GD-II, GD-III置于-20°C保存,有效期為24個月;

3 請于保質(zhì)期內(nèi)使用本產(chǎn)品,超過保質(zhì)期,請勿使用;

4 為確保本產(chǎn)品的質(zhì)量,請避免對其反復凍融。


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