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NK細胞培養

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更新時間:2017-08-02 11:35:05瀏覽次數:816次

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產品簡介

NK細胞培養現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!

詳細介紹

NK細胞培養,即自然殺傷細胞(Natural killer cell,NK)是機體重要的免疫細胞,不僅與抗腫瘤、抗病毒感染和免疫調節有關,而且在某些情況下參與超敏反應和自身免疫性疾病的發生,能夠識別靶細胞、殺傷介質。

NK細胞確切的來源還不十分清楚,一般認為直接從骨髓中衍生,其發育成熟依賴于骨髓的微環境。小鼠和人的體外實驗表明,胸腺細胞在體外IL-2等細胞因子存在條件下培養也可誘導出NK細胞。小鼠脾臟在體內IL-3誘導下可促進NK細胞的分化。NK細胞主要分布于外周血中,占PBMC5~10%,淋巴結和骨髓中也有NK活性,但水平較外周血低。

由于NK細胞具有部分T細胞分化抗原,如80~90%NK細胞CD2+,20~30%NK細胞CD3+(表達CD3ζ鏈),30%NK細胞CD8+(α/α)和75~90%NK細胞CD38+,而且NK細胞具有IL-2中親和性受體,在IL-2刺激下可發生增殖反應,活化NK細胞可產生IFN-γ,因此一般認為NK細胞與T細胞在發育上關系更為密切。

與T細胞、B細胞相比,NK細胞表面標志的特異性是相對的。人NK細胞mIg-,部分NK細胞CD2、CD3和CD8陽性,表達IL-2受體β鏈(P75、CD122),CD11b/CD18陽性。常用檢測NK細胞的標記有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94和LAK-1。

一種穩定表達在NK和LAK細胞表面的LAK-1分子,120kDa,NK細胞在IL-2條件下培養20天LAK-1仍為陽性,而HNK-1(CD57)和CD16部分消失。LAK的殺傷活性可被抗LAK-1 McAb所抑制。

 

NK細胞活化途徑:

 

1、通過CD3分子的ζ鏈

NK細胞不表達TCR/CD3復合物,但部分NK細胞表達CD3ζ鏈,當用CD16抗體刺激NK細胞活化時,ζ鏈發生*磷酸化,引起胞漿內Ca2+濃度升高,IP3水平增加,促進細胞因子合成和ADCC作用。

2、通過CD2分子

CD2與CD58相互作用或用CD2McAb刺激可活化NK細胞,CD3ζ鏈發生*磷酸化。

3、自然殺傷細胞刺激因子

自然殺傷細胞刺激因子(natural killer cell stimulatory factor,NKSF)對NK細胞有刺激作用。

IL-2、IL-12、IFN-α、TNF-α以及白細胞調節素(leukoregulin,LR)對NK細胞的活化和分化有正調節作用,體外培養時加入上述細胞因子可明顯提高NK的殺傷活性。前列腺素(PG)E1、E2、D2和腎上腺皮質激素等對NK細胞的活性有抑制作用。

NK細胞表面具有IL-2中親和性受體,IL-2誘導NK的殺傷活性約需18-24小時。此外,IL-2還可誘導NK細胞的增殖,一般在刺激后3~4天開始發生增殖,其機理為IL-2可誘導NK細胞表達IL-2Rα鏈,新表達的α鏈與原先細胞表面的β鏈和γ鏈結合形成高親和性受體,在IL-2存在下刺激NK細胞發生增殖。IL-2誘導NK細胞的活性機理尚不清楚,可能與增加細胞粘附分子的表達,提高對NK抵抗靶細胞的殺傷活性有關,還可能增加NK細胞胞漿中的顆粒以及*酯酶mRNA的表達,活化和促進殺傷介質的殺傷作用。

產品名稱規格價格
NK細胞培養1×10^8細胞/T25培養瓶來電可享受優惠

的過程:

操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
特點: 
1) 特異性強:只對腫瘤細胞進行有效識別和殺滅,而不傷害正常組織和細胞;抗瘤譜廣。 
2) 對體內各種腫瘤細胞均能有效治療。 
3) 安全性好,除可能出現的發熱、少量出血外,無其他不良反應。 
公司是*的ATCC細胞供應商,提供的報價,咨詢,稱技術服務,咨詢選購
半乳糖激酶1抗體 Galactose kinase
糖原蛋白2抗體 GYG2
磷酸半乳糖尿苷酸轉移酶1抗體 GALT
糖原蛋白1抗體 GYG1
葡萄糖合成酶2抗體 Glycogen synthase 2
谷草轉氨酶2抗體 GOT2
葡萄糖-6磷酸脫氫酶抗體 Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase
葡萄糖轉運蛋白5抗體 GLUT5
葡萄糖合成酶1抗體 Glycogen
G蛋白修補結構域蛋白8抗體 GPATCH8
甘油激酶3抗體 GK3
高爾基體磷蛋白3樣蛋白抗體 GOLPH3L
磷酸化*受體1抗體 phospho-GluR1 (Ser849)
G蛋白修補結構域蛋白1抗體 GPATCH1/ECGP
磷酸化G蛋白偶聯受體激酶相互作用蛋白1抗體 phospho-GIT1(Tyr510)
磷酸化G蛋白偶聯受體激酶相互作用蛋白1 phospho-GIT1(Tyr554)
葡萄糖激酶調節蛋白抗體 GKRP
GTP結合蛋白10抗體 GTPBP10
磷酸化Ras GTP酶活化蛋白結合蛋白1抗體 phospho-G3BP1(Ser232)
Ras GTP酶活化蛋白結合蛋白1抗體 G3BP1
γ氨基丁酸γ2受體/GABAA Rγ2抗體 GABA A Receptor gamma 2
磷酸化糖原合酶激酶3β抗體 phospho-GSK-3 Beta(Ser21+Ser29)
磷酸化G蛋白偶聯受體激酶相互作用蛋白1抗體 phospho-GIT1(Ser375)
磷酸化珠蛋白轉錄因子1抗體 phospho-GATA1(ser142)
磷酸化珠蛋白轉錄因子1抗體 phospho-GATA1(ser310)
G蛋白偶聯受體激酶相互作用蛋白1抗體 GIT1
磷酸化GATA結合蛋白6抗體 phospho-GATA6(Tyr271)
磷酸化γ氨基丁酸γ2受體/GABAA Rγ2抗體 phospho-GABRG2(Ser327)
蛋白/可溶性載質轉運蛋白Slc26a5抗體IgG 乳品類食物DNA分離試劑盒  0.2ml
Ai-SLC39A6/FITC  熒光素標記SLC39A6抗體IgG 食物DNA高質純化試劑盒  0.2ml
Ai-SLC40A1/FPN1/FITC  熒光素標記細胞膜鐵轉運蛋白SLC40A1抗體IgG 油脂DNA萃取試劑盒  0.2ml
Ai-SLK/Fyn/FITC  熒光素標記*蛋白激酶Fyn(同步原癌基因)抗體IgG 植物總RNA純化試劑盒(低多糖/酚)  0.2ml
Ai-Slit2/Slil3/FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠神經遷移蛋白Slit2/3抗體IgG 植物總RNA純化試劑盒(高多糖/酚)  0.2ml
Ai-SLT/SLT-IIe(O139) /FITC  熒光素標記抗豬水腫素(O139)抗體IgG 植物葉片葉綠體粗提分離試劑盒  0.2ml
Ai-Slug/FITC  熒光素標記鋅指轉錄因子Slug抗體IgG 植物葉片活性葉綠體分離試劑盒  0.2ml
Ai-Smac/DIABLO/FITC  熒光素標記線粒體促凋亡蛋白抗體IgG 植物葉片高質純化葉綠體分離試劑盒  0.2ml
Ai-phosphor-SMAD(p-Ser425)、phosphor-Mothers against decapeaplegic/FITC  熒光素標記磷酸化SMAD抗體IgG 植物種子葉綠體粗提分離試劑盒  0.2ml
Ai-Smad 1/FITC  熒光素標記Smad 1抗體IgG 植物種子活性葉綠體分離試劑盒  0.2ml
Ai-Phospho-Smad1 (Ser206) /FITC  熒光素標記磷酸化細胞信號轉導分子Smad-1抗體IgG 植物種子高質純化葉綠體分離試劑盒  0.2ml
Ai-Phospho-Smad1/5 (Ser463/465)/FITC  熒光素標記磷酸化細胞信號轉導分子Smad-1/5抗體IgG 可溶性植物葉綠體總蛋白制備試劑盒  0.2ml
Ai-Smad2/3 /FITC  熒光素標記Smad 2/3抗體IgG 可溶性植物葉綠體高純總蛋白制備試劑盒  0.2ml
Ai-phospho-Smad2(p-Ser465) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠、牛,馬,犬,雞磷酸化Smad2抗體IgG 可溶性純化葉綠體總蛋白制備試劑盒  0.2ml


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