【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
1.產品名稱：大鼠肝動脈內皮細胞操作步驟
2.組織來源：肝動脈組織
3.產品規格：5×10^5cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介：
大鼠肝動脈內皮細胞分離自肝動脈組織；在胚胎期，肝臟有3條動脈供血，分別來源于胃左動脈、腹腔動脈和腸系膜上動脈，這3條動脈分別供應肝臟的不同部位。出生后，一般保留一條動脈，大部分為起源于腹腔動脈的動脈，由其分出左、右肝動脈供應左、右半肝。偶爾也可見起源于胃左動脈的動脈或起源于腸系膜上動脈的動脈。但也有2條動脈并存的情況，如起源于腹腔動脈和起源于胃左動脈（25%），起源于腹腔動脈和起源于腸系臘上動脈（10%），而起源于胃左動脈和起源于腸系膜上動脈的2條動脈同時存在的情況比較少見。此外，還有5%像胚胎期一樣，3條動脈同時存在。這種起源于腹腔動脈以外的肝動脈稱為迷走肝動脈，如果肝臟沒有起源于腹腔動脈的動脈供血時，此種異位起源的肝動脈稱替代動脈，如果在常見肝動脈類型外，還有一支這種異位起始的動脈供應肝臟的一部分血流，這種肝動脈稱副肝動脈。肝動脈內皮細胞是襯于肝動脈內表面的單層扁平上皮，在炎癥時高表達黏附分子，與血流中白細胞表面黏附分子相互作用，從而介導白細胞穿越血管壁，亦屬一類非專職抗原提呈細胞。它們吞噬異物、細菌、壞死和衰老的組織，還參與集體免疫活動，包括：①血管收縮及血管舒張，從而控制血壓；②凝血（血栓形成及纖維蛋白溶解）；③動脈硬化；④血管生成；⑤炎癥及腫脹（浮腫）；⑥內皮細胞亦控制一些物質，如白血球進出血管。
本公司的大鼠肝動脈內皮細胞采用混合酶消化法結合差速貼壁法，并通過內皮細胞培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經CD31/vWF免疫熒光鑒定，純度可達85%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養基信息：
M199、FBS、內皮細胞生長添加劑、Heparin、Ascorbic Acid、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
2、*，專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株，免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態圖片，五天內有問題公司負責重發，超過五天時限至一個月內重發細胞收半價，超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠，完善、穩定的實驗體系，優秀的科研隊伍，*的實驗設備、準確可靠的實驗結果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
153kDa核孔蛋白(NUP153)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17590 CLIA Kit for IGF Like Family, Member 3 (IGFL3) 96T Mus musculus (Mouse)
絲裂原激活蛋白激酶激酶激酶1(MAP3K1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17591 CLIA Kit for IGF Like Family, Member 3 (IGFL3) 96T Rattus norvegicus (Rat)
抗OJ抗體(Anti-OJ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17592 CLIA Kit for IGF Like Family, Member 4 (IGFL4) 96T Homo sapiens (Human)
抗組蛋白抗體(AHA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17593 CLIA Kit for IGF Like Family, Member 1 (IGFL1) 96T Homo sapiens (Human)
磷脂酶A1(PLA1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17594 CLIA Kit for Chemokine Like Factor Superfamily 8 (CKLFSF8) 96T Homo sapiens (Human)
133kDa核孔蛋白(NUP133)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17595 CLIA Kit for Chemokine Like Factor Superfamily 8 (CKLFSF8) 96T Mus musculus (Mouse)
纖維蛋白原α(FGα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17596 CLIA Kit for Chemokine Like Factor Superfamily 8 (CKLFSF8) 96T Rattus norvegicus (Rat)
絲裂原激活蛋白激酶8(MAPK8)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17597 CLIA Kit for Chemokine Like Factor Superfamily 7 (CKLFSF7) 96T Homo sapiens (Human)
155kDa核孔蛋白(NUP155)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17598 CLIA Kit for Chemokine Like Factor Superfamily 7 (CKLFSF7) 96T Mus musculus (Mouse)
四旋蛋白27(TSPAN27)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17599 CLIA Kit for Chemokine Like Factor Superfamily 7 (CKLFSF7) 96T Rattus norvegicus (Rat)
胱天蛋白酶10(CASP10)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17600 CLIA Kit for Chemokine Like
Anti-CCL22/MDC NSE (neuron specific enolase) 神經元特異性烯醇化酶抗原 X57912 0.1ml
Anti-CCL21/6Ckine NTCP(Na+/taurocholate Cotransporting Polypeptide) 鈉離子/?；悄懰峁厕D運蛋白抗原 X57913 0.1ml
Anti-CCL26 Ghrelin 28 腦腸肽28 X57914 0.1ml
Anti-CCR-2/5 OCLN(Occluding) 咬合蛋白抗原 X57915 0.1ml
Anti-CCR-2A Oct-4(Octamer-4) 胚胎干細胞關鍵蛋白抗原 X57916 0.1ml
Anti-CCR-2B ODC(Ornithine decarboxylase) *脫羧酶抗原 X57917 0.1ml
Anti-CCR-7 ompF(putative outer membrane porin F protein) 小腸結腸炎耶爾森氏菌膜通道蛋白抗原 X57918 0.1ml
Anti-CXCL10/IP-10 OLFM1 peptide 嗅球蛋白1多肽抗原 X57919 0.1ml
Anti-CCR-8 ORX-A(orexin-A) 增食欲素-A/欲激素A抗原 X57920 0.1ml
Anti-CCR-9 OTR(oxytocin receptor) *受體 X57921 0.1ml
Anti-CCL28 OXR (Orexin receptor) 食欲素受體(多肽) X57922 0.1ml
Anti-CCR-10 P2P-R/RBBP6(proliferation potential protein related) 增殖潛能相關蛋白抗原 X57923 0.1ml
Anti-CCRK P19ARF p19ARF抑癌基因抗原 X57924 0.1ml
Anti-phospho-c-kit/SCFR/CD117 phospho-p38 ERK/MAPK14 (pThr180/pTyr182) peptide 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶p38抗原 X57925 0.1ml
Anti-CD138/Syndecan-1 MKK3(MAP Kinase Kinase 3) 絲裂原活化蛋白激酶MKK3/6抗原 X57926 0.1ml
Anti-CD146/MCAM P53(wt-p53) 腫瘤抑制基因抗原（野生型P53） X57927 0.1ml
Anti-CD141 Mtp53(Mutant type p53) 突變型P53抗原 X57928 0.1ml
