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EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0920操作步驟

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所  在  地上海市

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更新時(shí)間:2017-07-24 17:27:55瀏覽次數(shù):390次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0920操作步驟售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

細(xì)胞名稱  EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0920操作步驟
形態(tài)特性   淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性  懸浮生長(zhǎng)
特征特性   該細(xì)胞系來源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。 
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)   15%NBS
傳代方法   1:2傳代;5-6天一次
傳代情況  P2
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS 
支原體檢測(cè)  熒光法(-) 
STR   -
同工酶  
染色體  
使用權(quán)限  A類

細(xì)胞名稱EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0920操作步驟
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
價(jià)格來電可享受優(yōu)惠

冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
操作步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢(shì):
1、細(xì)胞株種類齊全,包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*,專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購(gòu)買本公司的細(xì)胞株,免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片,三天回傳細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)圖片,五天內(nèi)有問題公司負(fù)責(zé)重發(fā),超過五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià),超過一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系,優(yōu)秀的科研隊(duì)伍,*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
疫吸附試驗(yàn)法)    
形成素結(jié)合蛋白1(FNBP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
肌脂蛋白(SLN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
D-多巴色素變位酶(DDT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
歸巢關(guān)聯(lián)細(xì)胞黏附分子(HCAM)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
鈣網(wǎng)蛋白(CRT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
鈣腔蛋白(CALU)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子19(FGF19)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
S100鈣結(jié)合蛋白A8(S100A8)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
白介素17F(IL17F)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
ⅩⅢ型膠原(COL13)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
Ⅶ型膠原(COL7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
D-多巴色素變位酶(DDT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
彈性蛋白酶3B(ELA3B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
泛素關(guān)聯(lián)蛋白2(UBAP2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
尿溶蛋白3A(UPK3A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
序列相似家族20成員A(FAM20A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
半胱氨酰白三烯受體1(CYSLTR1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
彈性蛋白酶(ELA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
碳分解代謝物阻遏4樣蛋白(CCRN4L)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
巰基丙酮酸硫轉(zhuǎn)移酶(MPST)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
賴氨酰氧化酶樣蛋白2(LOXL2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫

 GDF8  生長(zhǎng)分化因子8/肌肉抑制素抗體 
 GDF9  生長(zhǎng)分化因子9抗體 
 GDF15/MIC-1  生長(zhǎng)分化因子15/巨嗜細(xì)胞抑制因子1抗體 
 GDNF  膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗體 
 Ribonuclease 6  核糖核酸酶6抗體 
 SIRT7  沉默調(diào)節(jié)樣蛋白SirT7抗體 
 Gelsolin  凝溶膠蛋白抗體 
 BPI  殺菌/通透性增強(qiáng)蛋白抗體 
 GFAP  膠質(zhì)纖維酸性蛋白抗體 
 phospho-GFAP (Ser8)  磷酸化膠質(zhì)纖維酸性蛋白抗體 
 SMYD2  組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶SMYD2抗體 
 SMYD3  組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶SMYD3抗體 
 SMYD4  組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶SMYD4抗體 
 SSX8  滑膜肉瘤X斷點(diǎn)蛋白8抗體 
 GFP  綠色熒光蛋白(免疫組化用抗體) 
 GFP  綠色熒光蛋白抗體 
 GFP  綠色熒光蛋白抗體 
 EGFP  重組增強(qiáng)型綠色熒光蛋白抗體 
 c-Maf  原癌基因cMAF抗體 
 c-Maf  原癌基因cMAF抗體 
 c-Myb  轉(zhuǎn)錄激活因子MYB抗體 
 GFRA4  GDNF家族受體α-4抗體 
 GFR Alpha-1  GDNF家族受體α-1抗體 
 GHR  生長(zhǎng)激素受體抗體 
 l-Myc  Myc基因肺癌相關(guān)蛋白抗體 
 Frizzled 5  Wnt信號(hào)受體蛋白抗體 
 Ghrelin/Obestatin  腦腸肽抗體 
 AARE  氧化蛋白質(zhì)水解酶 
 ABI2  腫瘤抑制基因ABI2/**蛋白激酶結(jié)合蛋白抗體 
 GHRF/GHRH  生長(zhǎng)激素釋放激素抗體 
 ID1  DNA結(jié)合抑制因子1抗體 
 GIG8/ID2  DNA結(jié)合抑制因子2抗體 
 ABI3  ABI基因家族2抗體 
 GIP  胃泌素抑制肽抗體 
 TNFRSF18/GITR  糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)腫瘤壞死因子受體抗體

 


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