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人1,25OH2D3elisa試劑盒說明書

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更新時間：2018-11-13 09:25:48瀏覽次數：192次

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產品簡介

公司提供elisa試劑盒為我司主營產品之一，產品皆嚴格按照相關標準進行，并經過了嚴格地反復地檢測，我們以嚴謹的態度保證產品的質量，從而保證您的實驗順利進行。人1,25OH2D3elisa試劑盒說明書供貨周期短，供貨及時，且我司還提供完整的售前和售后服務。

詳細介紹

人1,25OH2D3elisa試劑盒說明書的操作要點:
1）標本的采取和保存：可用作ELISA測定的標本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定（如血清、尿液），有些則需經預處理（如糞便和某些分泌物）。大部分ELISA檢測均以血清為標本；
2）試劑的準備：所需試劑、蒸餾水、去離子水、自配的緩沖液；
3）加樣：一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結合物，加底物。
4）保溫：ELISA中一般有兩次抗原抗體反應，即加標本和加酶結合物后。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間，這一保溫過程稱為溫育。
5）洗滌：洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外，手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6）顯色和比色：顯色是ELISA中的后一步溫育反應，此時酶催化無色的底物生成有色的產物。比色前應先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體，然后將板正確放入酶標比色儀的比色架中。儀器準備為酶標儀。
7）結果判斷：分定性判定和定量判定。
人1,25OH2D3elisa試劑盒說明書 Human 1,25OH2D3 ELISA Kit
人1,25OH2D3elisa試劑盒說明書 【實驗用途】1,25(OH)2D3是維生素D在體內的高度活性形式，皮膚中的7脫氫*在陽光或紫外光照射下轉化成維生素D3，在肝經25羥化酶系和腎臟1α羥化酶羥化作用下形成1,25(OH)2D3，是其在機體內發揮調節作用的基本形式。1,25(OH)2D3是抗炎癥活動的天然調節劑，不僅能預防MS的發生，還可降低疾病的活動度，并且適當的血藥濃度還可降低并發癥（骨折及肌無力等）的發生。1,25-(OH)2D3 是調節體內鈣穩定的重要激素，而24,25-(OH)2D3的作用很弱。L,25-(OH)2D3的生成受 PTH血液中鈣、磷的濃度及本身含量的調節。VD具有促進腸微絨毛上皮細胞合成鈣結合蛋白，促進鈣的吸收。促進破骨細胞活動并加強甲狀旁腺動員骨鈣的作用，使血鈣和血磷濃度升高。另還有促進腎小管對鈣磷的再吸收。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯免疫吸附測定試劑盒（ELISA）。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體，經*（biotin）標記。樣品和*標記抗體先后加入酶標板孔反應后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應；經過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。

人1,25OH2D3elisa試劑盒說明書試劑配制
1、酶聯板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、*標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液（HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、*標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
人1,25OH2D3elisa試劑盒說明書液體類標本：
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
1）血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
2）血漿：
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4）細胞培養上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/ 分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5）組織標本：
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
小鼠極低密度脂蛋白受體(VLDLR)ELISA試劑盒，英文名： VLDLR ELISA Kit