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立克次體PCR試劉盒

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更新時間：2019-10-22 15:56:07瀏覽次數：207次

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PCR檢測試劑盒

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產品簡介

立克次體PCR試劉盒是即用型PCR試劑盒的改良產品，含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應，具有廣泛的用途。

詳細介紹

產品名稱：立克次體PCR試劉盒
英文名稱：
產品分類：PCR檢測試劑盒
產品規格：50次
普通PCR反應流程：

產品及特點
1.即開即用，用戶只需要提供樣品模板，操作簡單，定量準確快速。
2.熒光定量 PCR 檢測，反應特異性強。
3.提供陽性對照，便于分析實驗結果。
4.PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳，本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

產品具有下列特點：
1. 改進了DOP-PCR的循環參數。
2. 優化的引物濃度，使自連序列和非模板相關序列的合成。
3. 可使用各種來源的樣品，包括全血，干血，發根，口腔粘膜刮液培養細胞，真菌和病毒等。
4. 操作簡便快捷，恒溫（30℃）反應，無須PCR儀即可實現擴增。
5. 產物可用于多種后續試驗，包括多重PCR、長片斷PCR、定量PCR、克隆、文庫構建、單倍型分析、測序、基因芯片分析、各種遺傳分析（片段差異，微衛星差異，SNP，STR）等。
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可*保存，但應避免反復凍融（多凍融3次）；
u 運輸：采用或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
*，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產品。
【使用方法】:
注：所有試劑使用前需*解凍，混合均勻，6,000rpm離心數秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關說明書；陽性質控品及陰性質控品無需提取，可直接使用。
2. 擴增試劑準備（PCR前準備區）
取N個（N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品）PCR反應管，每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。