試劑盒名稱:小鼠苗條素受體 LR/Ob-R
Pig Heat Shock 70kDa Protein 1A (HSPA1A) ELISA
規格: 96T/48T
品牌:BIOFINE
種屬:人ELISA試劑盒
檢測波長:450nm
所需樣本體積: 50-100ul
適用范圍:僅供科研
保存及有效期:2-8℃,六個月,-20℃一年
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體小鼠苗條素受體 LR/Ob-R含量。適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。
操作步驟:1. 編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)2. 加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。4. 配液:將 30(48T 的 20 倍)倍濃縮洗滌液加蒸餾水至 600ml 后備用5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,拍干。6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。7. 溫育:操作同 3。8. 洗滌:操作同 5。9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A 50μl,再加入顯色劑 B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘10. 終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色) 。11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值) 。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內進行。
實驗標準品圖:40 ng/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液20 ng/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液10 ng/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液5 ng/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液2.5 ng/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
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