高 GC 革氏陽性細菌 PCR Mix 5100 次原理合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
高 GC 革氏陽性細菌 PCR Mix 5100 次原理按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現 1.1Kb 的片段（如果使用隨機引物，將出現多個小片段）。
產品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶，內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提 供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
水中溶解性試驗：合格
層析試驗：合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：黃色或橄欖綠色粉末，溶于水。商品常為較穩定的氯化〖鋅〗復鹽
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)生物染色劑，組織化學研究用
〖保存〗：-20℃，避光
氨基10B
〖英文名稱〗：Amino black 10B；Buffalo black NBR；Acid black 1
〖其他名稱〗：萘酚藍；水牛NBR；酸性1；苯胺藍；酸性10B；酸性藍10B；酸性青光藍10B；4-氨基-5-羥基-3-(對硝基苯偶氮)-6-(苯偶氮)-2,7-萘二磺酸二鈉鹽；萘藍；對硝基苯偶氮-3,6-二磺酸-1-氨基-8-萘酚-7-偶氮苯鈉鹽
〖CAS號〗：1064-48-8
C22H14N6Na2O9S2=616.49
〖級別〗：AR
〖含量〗：≥80%
Lambda Max(nm)：616～620
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：藍色或褐色粉末。溶于水(呈藍色)、乙醇(呈深藍色)和溶纖劑(二乙醇一乙迷)，微溶于丙同，不溶于其他有機溶劑。遇濃硫酸顯藍綠色，經稀釋成深綠藍色沉淀。遇濃硝酸顯深綠色溶液。與10%氫氧溶液顯紅色熒光的藍色溶液。水溶液加入濃鹽酸生成綠藍色沉淀，加入濃氫氧溶液成藍色沉淀。染色時，遇銅；〖鐵〗離子，其色澤前者微有變化，后者略帶淺綠
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)電泳試劑，用于對聚丙烯酰胺凝膠、瓊脂糖凝膠和硝酸纖維素膜上蛋白質的染色。在電泳后，*固定蛋白質在膠上。膠用 0.1% 氨基10B的7% (v/v) 醋酸溶液染至少2 小時，然后用7% (v/v) 醋酸溶液脫色。檢測靈敏度大概是考馬斯亮藍R250的20%。氧化還原指示劑
〖保存〗：RT
小鼠抗 V5 標簽單抗 腺嘌呤
小鼠抗 MBP 標簽單抗 腺嘌呤硫酸鹽
小鼠抗 MBP 標簽單抗 消解酶 ( 溶細胞酶 ) 干粉
小鼠抗 GFP 標簽單抗 硝苯吡啶
小鼠抗 GFP 標簽單抗 硝酸纖維素膜，13×20cm
小鼠抗 mCherry 標簽單抗 硝酸纖維素膜，13×20cm
小鼠抗 mCherry 標簽單抗 *
小鼠 RFP 標簽單抗 小 RNA 克隆試劑盒
小鼠 RFP 標簽單抗 小膠質細胞生長因子
小鼠抗 VSV-G 標簽單抗 小牛胸腺 DNA
小鼠抗 T7 標簽單抗 小牛胸腺 DNA 溶液
小鼠抗 T7 標簽單抗 小鼠 NK 細胞分離液 1.076
小鼠抗 CBP 標簽單抗 小鼠 RFP 標簽單抗
小鼠抗 HSV 標簽單抗
