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上海邦景實業有限公司
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古細菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次原理運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。
古細菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次原理產品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
古細菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次原理合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。
蘇丹紅7B
〖英文名稱〗:Sudan red 7B;Fat Red 7B;Fat red bluish;Solvent Red 19
〖其他名稱〗:溶劑紅19;脂肪紅7B;鄰甲氧基苯(偶氮-1)-2-萘酚;蘇丹紅G;蘇丹紅R
〖CAS號〗:6368-72-5
C24H21N5=379.46
〖級別〗:BS
〖含量〗:≥80%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:波爾多色或暗紅色至紫色結晶粉末。和水混溶,溶于丙同和苯,微溶于醇。溶點130℃
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT,避光
H33258熒光染料
〖英文名稱〗:BBIH;Bisbenzimide H33258;HOE 33258;Hoechst 33258
〖其他名稱〗:赫斯特熒光燃料33258;甲嗪雙苯咪酚;雙苯咪唑;*己可堿;雙苯并咪唑H33258三鹽酸鹽;熒光染料33258
〖CAS號〗:23491-45-4
C25H24N6O?3HCl=533.88
〖級別〗:For fluorescence
〖含量〗:≥98% (HPLC)
熒光性:λex 355 nm; λem 465 nm in TE buffer; DNA
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:黃色至黃綠色粉末,〖熔點〗>300℃。zui大吸收波長 343nm。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)熒光色素。熒光染色法和免疫熒光技術。用于與DNA鍵聯的熒光染色劑。細胞遺傳學研究的常用試劑,熒光染色細胞的DNA ,插入DNA的A-T區,具有低的細胞毒性,形成膜滲透性熒光DNA鏈
〖保存〗:2~8℃
H33342熒光染料
人源脫嘌呤 / 脫嘧啶 (AP) 核酸內切酶激酶 小鼠淋巴細胞分離液 1.092
T7 核酸內切酶 I 小鼠內皮細胞分離液 1.071
Tma 核酸內切酶 III 小鼠胰島細胞分離液 1.072
核酸內切酶 IV 小鼠中性粒細胞分離液 1.100
核酸內切酶 III (Nth) 小鼠細胞分離液 1.070
核酸內切酶 V 心肌黃酶
T4 核酸內切酶 V 心肌細胞生長因子
核酸內切酶 VIII 辛甲基 β 葡糖苷
烷基腺嘌呤 DNA 糖基化酶 辛甲基硫吡喃葡萄糖苷 (OTG)
甲酰胺嘧啶 [fapy]-DNA 糖基化酶 新生霉素
8- 氧代* DNA 糖基化酶 新生霉素溶液 ,50mg/mL
* -DNA 糖基化酶 星形膠質細胞生長因子
Y2HGold 酵母菌種
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