植物種屬鑒定 PCR Mix 9100 次實(shí)驗(yàn)方法產(chǎn)品及特點(diǎn):
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長(zhǎng) cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長(zhǎng)可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提 供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
植物種屬鑒定 PCR Mix 9100 次實(shí)驗(yàn)方法合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長(zhǎng)度成反比。 RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對(duì)富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對(duì)照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標(biāo)記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測(cè)。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機(jī)引物，將出現(xiàn)多個(gè)小片段）。
〖其他名稱〗：碘化丙錠
〖CAS號(hào)〗：25535-16-4
C27H34I2N4=668.39
〖級(jí)別〗：BR
〖含量〗：≥94.0%(HPLC)
溶解性：Red solution at 1mg/ml in water
Water by karl fischer：≤5.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：紅色粉末，對(duì)濕、光、空氣敏感。〖熔點(diǎn)〗220～225℃(分解)。有導(dǎo)致遺傳損害可能性。有刺激性
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)核酸熒光染色劑
〖保存〗：2～8℃，保質(zhì)期4年
N-乙基-N-（2-羥基-3-磺丙基）-3,5-二甲氧基苯胺鈉鹽
〖英文名稱〗：DAOS；N-Ethyl-N-(2-hydrroxt-3-sulfopropyl)-3,5-dimethoxyaniline sodium salt
柱式醬油 DNAout 印跡膜抗體稀釋液
免 RNA 提取 RT-PCR 試劑盒 茚三酮
DNA 上樣液 ( 紅 ),6×( 非甘油 ) 熒光胺
DNA 上樣液 ( 藍(lán) ),6×( 非甘油 ) 熒光尺
超螺旋 DNA 分子量標(biāo)準(zhǔn) 熒光法死細(xì)胞檢測(cè)試劑盒
PAGE 膠長(zhǎng)加樣槍頭 熒光染色細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒
水飽和正丁醇 熒光素 (FITC) 標(biāo)記親和素
預(yù)混型丙烯酰胺 - 甲叉雙丙烯干粉 (19:1) 熒光素標(biāo)記的*
預(yù)混型丙烯酰胺 - 甲叉雙丙烯干粉 (29:1) *
冷凍型血液 RNA 保存液 熒光增白劑 28
柱式 G+細(xì)菌 RNAout 螢火蟲熒光素
柱式病毒 RNA-DNA 雙提試劑盒 螢火蟲熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒
凝膠法 miRNA 分離試劑盒 油紅 O
雜交管 (
會(huì)員1.png)
