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上海邦景實業有限公司
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植物種屬鑒定 PCR Mix 7100 次價格運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。
植物種屬鑒定 PCR Mix 7100 次價格合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
植物種屬鑒定 PCR Mix 7100 次價格按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:類白色或淡黃色結晶粉末。〖熔點〗300℃,對光和濕敏感。溶于水,在25℃以上不穩定,其溶液緩慢分解。zui大吸收波長310nm
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)測定酸性和堿性磷酸酶(phosphatases)的顯色底物;反應能產生黃色的末端產物,在波長405nm可以讀取,該反應能被3 N NaOH溶液終止。
〖保存〗:-20℃,避光
5,5-二巰基-2,2-二硝基苯甲酸
〖英文名稱〗:DTNB;5,5′-Dithiobis(2-nitrobenzoic acid) ;3-Carboxy-4-nitrophenyl disulfide;Ellmann's Reagent
〖其他名稱〗:5,5'二硫代雙(2-硝基苯甲酸);雙(3-羧基-4-硝基苯基)二硫;6,6ˊ-二硝基-3,3ˊ-二硫代苯甲酸;二硫代硝基苯甲酸;5,5'-二硫代二(2-硝基苯甲酸)
〖CAS號〗:69-78-3
C14H8N2O8S2=396.36
〖級別〗:BR
〖含量〗:≥99.0%(HPLC)
水分:≤1.0%
溶解性(1%甲醇溶液):澄清、透明
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:類白色或黃色粉末。微溶于乙酸和水。有刺激性
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)測定蛋白質、多肽和組織中巰基的靈敏試劑。有機磷農藥中毒的監測(*酯酶測定)
〖保Cy5-dCTP 溶液,10mM 雜交管 (35×300mm)
Sephadex G50 介質 增強型 DAB 顯色試劑盒
DAB 法雜交試劑盒 增強型天狼猩紅染色試劑盒
TMB 法雜交試劑盒 章魚堿
AP 標記的抗抗體 *期 SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )(>30KD)
AP 標記的抗*抗體 *期 SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )(2-30KD)
HRP 標記的抗抗體 *期 SDS-PAGE 還原劑
HRP 標記的抗*抗體 *期 SDS-PAGE 配膠液
cDNA 第二鏈合成試劑盒 *期 SDS-PAGE 上樣液
RIPA 裂解液 ( 強 ) 蔗糖
RIPA 裂解液 ( 中 ) 真菌 DNAout
支鏈淀粉
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