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植物種屬鑒定 PCR Mix 5100 次原理

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更新時間:2017-01-19 16:23:44瀏覽次數:236次

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產品簡介

植物種屬鑒定 PCR Mix 5100 次原理運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細介紹

植物種屬鑒定 PCR Mix 5100 次原理產品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
植物種屬鑒定 PCR Mix 5100 次原理合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。

〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:深色或暗紅色結晶性粉末。微溶于水,易溶于濃酸、堿溶液。在不存在氧化劑、還原劑時水溶液穩定。強的氧化劑、還原劑可使其褪色,在酸性溶液中可因濃度不同而呈紅色或紫色。當有鈮存在時,呈深藍色,與鈮以1:1形成絡合物。克分子消光系數為32000,在630nm處有zui大吸收峰
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)顯色劑,測鈮的靈敏試劑,也可測定鋯、鉍、〖鉛〗、鈧、鉬和銅。螯合劑。工業上用于光度法測定鋼、礦石中的鎢、鈾、鈹,合金、巖礦中的鈮
〖保存〗:RT,避光
二乙基二硫代氨基甲酸銀鹽
〖英文名稱〗:DETC;AgDDTC ;Diethyldithiocarbamic acid silver salt 
〖其他名稱〗:〖砷〗試劑;二乙氨基二硫代甲酸銀;二乙基氨荒酸銀;DDTC銀鹽;(二乙基二硫代氨基甲酸-S,S')銀 
〖CAS號〗:1470-61-7 
C5H10AgNS2=256.14 
〖級別〗:IND
〖含量〗:≥98.0%
吡啶溶解試驗:合格
〖砷〗鉻合物摩爾吸收系數ε/(L/cm?mol):1.35×104~1.66×104 
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:淺黃色結晶。對濕空氣和光敏感。易溶于吡啶和氯方,幾乎不溶于水、苯、丙同和乙醇,易溶于吡啶和甲烷。在一定條件下,與〖〗化氫反應形成紅色產物。〖熔點〗 172~175℃
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)微量〖砷〗和銻的光度測定。和Fe2+結合檢測大腦、腎、肝和其它組織中的NO,同時直接測量NO和 pO2 ;作為銅的螯合劑,還用于依靠ESR定量分析生物材料里的銅;〖砷〗試劑也是超氧化物歧化酶, 抗壞血酸氧化酶和其它酶的抑制劑。抑制巨噬細胞NO合成酶
〖保存〗:2~8℃,避光
茜素
〖英文名稱〗:Alizarin;1,2-Dihydroxy anthraquinone;C.I. 58000;Mordant Red 11;Alizarin Red;Dihydroxy-9,10-anthracenedione;1,2-Dihydroxy-9,10-anthracenedione 
〖其他名稱〗:1,2-二羥基蒽醌;1,2-二羥基-9,10-蒽二酮;酸性媒介紅B;酸性媒介紅11;茜草素;媒染紅11

DNA  Tween 20    支氣道上皮細胞生長因子
*,測序    支氣管上皮細胞生長因子
彈性蛋白酶    脂蛋白 PAGE 染液
*    脂蛋白純化試劑盒
嗜熱菌蛋白酶    脂肪酶
*,質譜    脂褐質測試盒
人基因組 DNA,男性    脂質氧化 (MDA) 檢測試劑盒
人基因組 DNA,女性    直鏈淀粉
小鼠基因組 DNA    植酸
人基因組 DNA 混合液    植酸鈉
人培養細胞基因組 DNA    植物 Actin 小鼠單抗
DNA 5’末端標記試劑盒    植物 Actin 小鼠單抗
Tfl DNA 聚合酶    植物 DNAout
dUTP 溶液,100mM     植物 RNA 提取高鹽溶液
即用型 EMSA 試劑盒    植物 RNAout
人重組 AP1(c-Jun)    植物 RNAout
人重組 TFIIB    植物蛋白酶抑制劑
miRNA 熒光定量檢測試劑盒    植物凝膠
 轉移酶    植物總蛋白質微量提取試劑 (2DE) 
    中性親和素蛋白


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