植物種屬鑒定 PCR Mix 4100 次實驗方法合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
植物種屬鑒定 PCR Mix 4100 次實驗方法按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機引物，將出現(xiàn)多個小片段）。
產(chǎn)品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提 供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標記等。
〖CAS號〗：72-48-0
C14H8O4=240.21
〖級別〗：IND
pH變色域：5.8(黃)～7.2(紫紅)
靈敏度試驗：合格
乙醇溶解試驗：合格
〖灼燒殘渣〗：≤3.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：橙紅色結(jié)晶或棕黃色粉末。易溶于熱甲醇和25℃時的乙迷,溶于苯、甲苯、二甲苯、吡啶、二硫化碳和冰乙酸及300份沸水,微溶于乙醇。溶于堿的水溶液呈藍色但無熒光。110℃升華(0.27kPA)。〖熔點〗290℃。沸點430℃。
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)酸堿指示劑(0.5%溶液)。作鋁、銦、汞、〖鋅〗和鋯的點滴試劑。神經(jīng)組織和原生動物活體染色的染色劑
〖保存〗：RT
茜素紅
〖英文名稱〗：Alizarin red；Sodium alizarin sulfonate；Alizarin sulfonic acid sodium salt；Alizarin S；Alizarin carmi ne；C.I. 5800
〖其他名稱〗：茜素紅S；茜素磺酸鈉；茜素S；茜素胭脂紅；1,2-二羥基蒽醌-3-磺酸鈉；媒介紅3；9,10-二氫-3,4-二羥基-9,10-二氧代-2-蒽磺酸單鈉鹽
〖CAS號〗：130-22-3
C14H7NaO7S?H2O=360.27
〖級別〗：IND
pH變色域：4.3(黃)～6.3(紫)
對鋁靈敏度試驗：合格
對酸和堿靈敏度試驗：合格
CHAPS 植物線粒體純化試劑盒 ( 粗提 )
辛甲基 β 葡糖苷 植物線粒體純化試劑盒 ( 精提 )
辛甲基硫吡喃葡萄糖苷 (OTG) 植物線粒體總蛋白提取試劑盒
n- 十二烷基 -β-D- 麥芽糖苷 植物血球凝集素 M
脫氧膽酸鈉 植物血球凝集素 P
膽酸鈉 植物葉綠體純化試劑盒
十二烷基磺酸鈉 植物葉綠體蛋白提取試劑盒
去垢劑去除樹脂 植物種屬鑒定 PCR Mix 1
十二烷基磺酸鈉清除劑 植物種屬鑒定 PCR Mix 10
β- 基乙醇，蛋白 植物種屬鑒定 PCR Mix 11
DTT，蛋白 植物種屬鑒定 PCR Mix 2
DTT，免稱量蛋白 植物種屬鑒定 PCR Mix 3
TCEP 鹽酸膦 植物種屬鑒定 PCR Mix 4
TCEP 溶液，0.5M 植物種屬鑒定 PCR Mix 5
鈷柱介質(zhì) 植物種屬鑒定 PCR Mix 6
咪唑 植物種屬鑒定 PCR Mix 7
亞氨二乙酸介質(zhì) 植物種屬鑒定 PCR Mix 8
GST 固定試劑盒 植物種屬鑒定 PCR Mix 9
* S
