鳥類種屬鑒定 PCR Mix100 次實驗步驟產品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶，內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提 供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
鳥類種屬鑒定 PCR Mix100 次實驗步驟合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現 1.1Kb 的片段（如果使用隨機引物，將出現多個小片段）。
〖CAS號〗：1324-80-7
C37H30N3O4S=612.72
〖級別〗：IND
pH變色域：9.4(藍)～14.0(紅)
λmax：599～603nm（甲）
〖灼燒殘渣〗：≤0.3
吸光度：≥0.540(5 mg/L, 599.0 - 603.0 nm, 甲醇)(以干物質計)
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：藍紫色或藍色粉末。易溶于乙醇、乙二醇乙迷、乙二醇,醇溶液為綠藍色。溶于熱水呈藍色溶液,稍溶于乙酸乙酯、苯甲醇、甘油和苯甲酸乙酯,微溶于氯方、吡啶和二氧六環,不溶于橄欖油和冷水。加鹽酸于水液中析出藍色沉淀。遇氫氧呈紅棕色溶液,遇硫酸呈紅棕色溶液,稀釋時析出藍色沉淀。
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)酸堿指示劑，用于測定石油酸〖堿度〗。生物染色，氮肥分析
〖保存〗：RT
偶氮氯膦Ⅰ
〖英文名稱〗：CPA-I；Chlorophosphonazo I ；1,8-Dihydroxy-2-［(4-chlorophenylphosphonic acid)-azo-3,6-naphthalenedisulfonic acid monosodiums
〖其他名稱〗：偶氮氯磷Ⅰ；2-(4-氯-2-膦酸基苯偶氮)-1,8-二羥基萘-3,6-二磺酸一鈉鹽；3-[(4-氯-2-膦酰苯基)偶氮]-4,5-二羥基-2,7-萘二磺酸二鈉鹽
〖CAS號〗：85561-96-2
C16H11ClN2NaO11PS2?3H2O=614.86
動物種屬鑒定 PCR Mix 3 柱式昆蟲 mtDNAout，測序
動物種屬鑒定 PCR Mix 4 柱式昆蟲 RNAout
動物種屬鑒定 PCR Mix 5 柱式毛發 DNAout
動物種屬鑒定 PCR Mix 6 柱式內毒素清除劑
昆蟲種屬鑒定 PCR Mix 柱式尿液 DNAout
無脊椎動物種屬鑒定 PCR Mix 柱式凝固血液 DNAout
兩棲類和爬行類動物種屬鑒定 PCR Mix 柱式葡萄球菌 RNAout
魚類種屬鑒定 PCR Mix 柱式軟骨 RNAout
鳥類種屬鑒定 PCR Mix 柱式軟體 RNAout
哺乳動物種屬鑒定 PCR Mix 柱式軟體動物 DNAout
植物種屬鑒定 PCR Mix 1 柱式石蠟包埋組織 DNAout
植物種屬鑒定 PCR Mix 2 柱式石蠟包埋組織 DNAout2.0（二代測序）
植物種屬鑒定 PCR Mix 3 柱式拭子 DNAout
植物種屬鑒
