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上海邦景實業有限公司
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魚類種屬鑒定 PCR Mix100 次價格運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。
魚類種屬鑒定 PCR Mix100 次價格產品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
魚類種屬鑒定 PCR Mix100 次價格合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。
〖級別〗:顯色劑
比耳定律試驗:合格
對鎂靈敏度試驗:合格
水溶解試驗:合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:深紅色結晶性粉末。易溶于水。在中性和酸性溶液中呈紅色,在堿性溶液中呈紫色,在弱酸溶液中與一系列元素反應都由紅色變為紫色,僅與六價鈾反應呈淺藍色。與鈾(Ⅵ)生成絡合物的zui大吸收波長 605nm。摩爾吸光系數為2.31×105,溶液的吸光度在pH為5.2~8.0范圍內可保持不變。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)光度測定鈾(Ⅵ)。珠墨鑄〖鐵〗、鋁合金、〖鋅〗合金中測定鎂
〖保存〗:RT
偶氮氯膦Ⅲ
〖英文名稱〗:CPA-Ⅲ;Chlorophosphonazo Ⅲ;3,6-Bis[(4-chloro-2-phosphonophenyl)azo]-4,5-dihydroxynaphthalene-2,7-disulphonic acid
〖其他名稱〗:偶氮氯磷Ⅲ;2,7-雙(4-氯-2-膦羧苯偶氮)-1,8-二羥基萘-3,6-二磺酸;氯膦酸偶氮III
〖CAS號〗:1914-99-4
C22H16Cl2N4O14P2S2?4H2O=801.33
〖級別〗:顯色劑
對稀土金屬靈敏度試驗:合格
水溶解試驗:合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:紫褐色結晶性粉末。易溶于水,微溶于乙醇和丙同,不溶于乙迷、苯、氯方。在pH<3的水溶液中呈玫瑰紅色,pH=3的水溶液中呈玫瑰紅色略帶紫色,pH>4時轉為紫色。在濃硫酸中呈淺綠色。在濃硝酸中分解。在氫氧和碳酸鈉溶液中呈淺藍色。摩爾吸光系數為74,500~75,500,具有比偶氮胂Ⅰ更高的絡合性能。
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