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兩棲類和爬行類動物種屬鑒定 PCR Mix100 次原理

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更新時間:2017-01-19 16:17:57瀏覽次數:223次

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產品簡介

兩棲類和爬行類動物種屬鑒定 PCR Mix100 次原理運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細介紹

兩棲類和爬行類動物種屬鑒定 PCR Mix100 次原理產品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
兩棲類和爬行類動物種屬鑒定 PCR Mix100 次原理合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。

〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)分光光度測定鈾和鈣??稍诓煌瑮l件下與鈣、鋇、鎂、銅、〖鋅〗、〖鉛〗、〖鐵〗、鈷、〖鎳〗、鈹、鋁、釔、釷、鈰和銨等形成有色絡合物
〖保存〗:RT
偶氮氯膦mA
〖英文名稱〗:CPA-mA;Chlorophosphonazo mA 
〖其他名稱〗:2-(4-氯-2-膦酸基苯偶氮)-7-(3-乙?;脚嫉?-1,8-二羥基萘-3,6-二磺酸
〖CAS號〗:86167-87-5
C24H18C1N4O12PS2=684.98
〖級別〗:顯色劑
對稀土金屬靈敏度試驗:合格
比耳定律試驗:合格
水溶解試驗:合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:深紫紅色結晶性粉末。易溶于水,在中性和酸性溶液中呈紫紅色
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)在酸性介質中與稀土元素形成藍色絡合物。用于低品位稀土元素的測定,低合金鋼、球墨鑄〖鐵〗中稀土總量和鎂的測定
〖保存〗:RT
偶氮氯膦mN
〖英文名稱〗:CPA-mN;Chlorophosphonazo mN 
〖其他名稱〗:2-(4-氯-2-膦酸基苯偶氮)-7-(3-硝基苯偶氮)-1,8-二羥基萘-3,6-二磺酸
〖CAS號〗:77350-04-0
C22H15ClN5O13PS2=687.94 
〖級別〗:顯色劑

轉 Lectin 基因植物 PCR Mix    柱式細菌 RNAout
真菌種屬鑒定 PCR Mix 1    柱式血清血漿 DNAout
真菌種屬鑒定 PCR Mix 2    柱式血清血漿 RNAout
真菌種屬鑒定 PCR Mix 3    柱式血液 DNAout
真菌種屬鑒定 PCR Mix 4    柱式血液 DNAout
真菌種屬鑒定 PCR Mix 5    柱式血液 DNA-RNAout
真菌種屬鑒定 PCR Mix 6    柱式血液 mtDNAout,測序
真菌種屬鑒定 PCR Mix 7    柱式血液 RNAout
古細菌種屬鑒定 PCR Mix 1    柱式藻類 RNAout
真細菌種屬鑒定 PCR Mix 2    柱式真菌 DNAout
古細菌 + 真細菌種屬鑒定 PCR Mix 3    柱式真菌 RNA-DNA 雙提試劑盒
草桿菌 PCR Mix 4    柱式真菌 RNAout
高 GC 革氏陽性細菌 PCR Mix 5    柱式植物 DNAout
鏈霉菌 PCR Mix 6    柱式植物 mtDNAout,測序
Poly r(A)    柱式植物 RNA-DNA 雙提試劑盒
Poly(I).Poly(C)    柱式植物 RNAout
Percoll    柱式植物 RNAout 2.0
gG(H+L),


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