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上海邦景實業(yè)有限公司
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更新時間:2017-01-19 16:12:41瀏覽次數(shù):200次
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動物種屬鑒定 PCR Mix 5100 次價格運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。
動物種屬鑒定 PCR Mix 5100 次價格產(chǎn)品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶,內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標記等。
動物種屬鑒定 PCR Mix 5100 次價格合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)R坏?RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現(xiàn)多個小片段)。
〖英文名稱〗:Murexide;Acid ammonium purpurate;Ammonium purpurate;5,5′-Nitrilodibarbituric acid ammonium salt
〖其他名稱〗:氨基紫色酸;紅紫酸銨;骨螺紫;紫尿酸胺;5,5′-次氮基二巴比土酸〖銨鹽〗;5-((六氫-2,4,6-三氧代-5-嘧啶基)亞氨基)-2,4,6(1H,3H,5H)嘧啶三酮單〖銨鹽〗
〖CAS號〗:3051-09-0
C8H8N6O6=284.19
〖級別〗:IND
絡(luò)合試驗:合格
〖灼燒殘渣〗:≤0.1%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:紅紫色結(jié)晶性粉末,帶有綠色金屬光澤。能與許多陽離子形成各種顏色的絡(luò)合物。溶于熱水,微溶于冷水,幾乎不溶于乙醇和乙迷。其水溶液呈深紫色,并隨〖PH值〗不同而不同,在堿性溶液中呈深藍色,在酸性溶液中為無色。水溶液極易變質(zhì)。〖熔點〗>300℃。zui大吸收波長(水中)520nm。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)絡(luò)合指示劑(用以滴定鈣、銅、鈷、〖鎳〗、錳、鈧、〖鋅〗等)。鈣的光度測定
〖保存〗:RT,避光
鄰甲*
〖英文名稱〗:o-Cresolphthalein;3,3′-Dimethylphenolphthalein;3,3-Bis(4-hydroxy-3methylphenyl)-1-(3H)-isobenzofuranone
〖其他名稱〗:鄰甲酚呋酞;2-甲*, 3,3′-二甲基*;3,3-雙(4-羥基-3-甲基苯基)-1(3H)-異苯并呋喃酮;鄰甲苯*;3,3'-二甲*;鄰甲酚酜酞
96 孔板病毒 RNAout( 真空法 ) β- 氨基丙
超敏化學發(fā)光 (AP) 檢測試劑盒(ECL) β- 半乳糖苷酶
磁珠法 mRNA 提取試劑盒 β- 半乳糖苷酶檢測試劑盒
96 孔板血液 DNAout( 離心法 ) β- *
Deep Vent DNA 聚合酶 β- 甘油磷酸二鈉鹽
Therminator II DNA 聚合酶 β- 環(huán)狀糊精
96 孔板病毒 DNAout( 真空法 ) β- 硫代*酸
一步法 96 孔板質(zhì)粒 DNAout( 真空法 ) β -萘乙酸
一步法96 孔板單菌落質(zhì)粒DNAout( 真空法) β- 葡萄糖苷酶
.5mM
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