動物種屬鑒定 PCR Mix 4100 次原理合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
動物種屬鑒定 PCR Mix 4100 次原理按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現 1.1Kb 的片段（如果使用隨機引物，將出現多個小片段）。
產品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶，內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提 供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
〖CAS號〗：596-27-0
C22H18O4=346.38
〖級別〗：IND
pH變色域：8.2(無色)～9.8(紅色)
紅外光譜鑒定：和對照品匹配
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：白色或黃色結晶性粉末。易溶于乙醇、乙迷和冰乙酸，溶于稀堿溶液呈紫色，微溶于水，不溶于苯。〖熔點〗223℃。zui大吸收波長 566(381)nm
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)酸堿指示劑
〖保存〗：RT
鄰甲*絡合劑
〖英文名稱〗：o-Cresolphthalein complexon；Me-talphthalein I；o-Cresolphthalexon；Phthalein purple；Phthalein complexone；o-Cresolphthalein di(methylaminodiacetic acid)
〖其他名稱〗：N,N'-[(3-氧代-1(3H)-異苯并呋喃基亞基]雙[(6-羥基-5-甲基-3,1-亞苯基)亞甲基]雙[N-(羧基甲基)*]；酞紫；金屬酞；*紫；2-甲*絡合劑；3',3''-雙[[雙(羧甲基)氨基]甲基]-5', 5''-二甲基*
〖CAS號〗：2411-89-4
C32H32N2O12=636.61
〖級別〗：AR
〖含量〗（分光光度法）：≥80.0%
靈敏度：合格
〖水溶解實驗劑〗：合格
細胞計數液 (Vi-CELL 儀 ) β －瓊脂糖酶
Protein A+G 瓊脂糖 β- 瓊脂糖酶Ⅰ
即用型 GFP 標簽蛋白裂解液 β- 瓊脂糖酶Ⅰ
動態顯色法內毒素定量試劑盒 β- 基乙醇
動態濁度法內毒素定量試劑盒 β- 基乙醇，蛋白
WGA 糖蛋白分離試劑盒 β- 基乙醇，電泳
大提柱式酵母 DNAout β-Actin 小鼠單抗
小牛胸腺 DNA 溶液 β-Actin 小鼠單抗
DNA 探針變性液 β-D- 阿糖胞苷
MMLV 逆轉錄酶 (H-) β-Tubulin 小鼠單抗
耐熱型 MMLV 逆轉錄酶 (H-) β-Tubulin 小鼠單抗
96 孔板 PCR 片段純化回收試劑盒 ( 真空法 ) γ
PCR Mix 染料 γ- 環狀糊精
DAB 法*雜交試劑盒 γ- 球蛋白 ( 牛血 )
TMB 法*雜交試劑盒 λ 噬菌體 DNAout
ATP 溶液，2.5mM φ
UTP 溶液，2.5mM φ29 DNA 聚合酶
GTP 溶液，2
