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上海邦景實業有限公司
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胚胎裂解液1mL原理運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。
胚胎裂解液1mL原理產品介紹：
胚胎裂解液1mL原理產品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶，內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提 供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現 1.1Kb 的片段（如果使用隨機引物，將出現多個小片段）。
〖保存〗：RT
鈣黃綠素二鈉鹽
〖英文名稱〗：Calcein disodium salt；Bis[N,N-di(carboxymethyl)aminomethyl]fluorescein disodium salt, Fluorescein-bismethyliminodiacetic acid disodium salt
〖其他名稱〗：鈣黃綠素鈉鹽
〖CAS號〗：108750-13-6
C30H24N2Na2O13=666.50
〖級別〗：BS〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：橙色或棕色粉末或晶體，溶于水
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗
〖保存〗：RT
鉻T
〖英文名稱〗：Eriochrome black T；1-(1-Hydroxy-2-naphthylazo)-6-nitro-2-naphthol-4-sulfonic acid sodium salt；C.I.Mordant black II；C.I. 14645
〖其他名稱〗：依來鉻T；羊毛鉻T；媒介T；酸性媒介T；1-(1-羥基-2-萘偶氮)-6-硝基-2-萘酚-4-磺酸鈉
〖CAS號〗：1787-61-7
C20H12N3NaO7S=461.38
〖級別〗：IND
PLPD 固定液 超快轉染試劑盒
Methacarn 固定液 高效 E.coli 感受態細胞制備試劑盒
PFG 固定液 鈣蛋白酶抑制劑Ⅱ溶液，10mg/mL
對苯醌固定液 *抑制劑溶液，20mg/mL
ECD-G 固定液 細胞核微量制備試劑盒
細胞周期與凋亡檢測試劑盒（PI 法） 干粉型 LB 培養基
Zamboni 固定液 銀染清除劑
考馬斯亮藍 R-250 染液 鮭魚精 DNA 溶液
DB3.1 感受態細胞 重蒸酚
SYBR Green II 核酸染料 酸酚
態細胞 Oligo dT12-18 引物，0.5μg/μL
電泳溴酚藍溶液
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