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上海邦景實業有限公司
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單細胞懸浮液1mL實驗方法運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。
單細胞懸浮液1mL實驗方法產品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
單細胞懸浮液1mL實驗方法產品介紹:
合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。
靈敏度試驗:合格
〖灼燒殘渣〗(以〖硫酸鹽〗計):≤20.0%
水溶解試驗:合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:棕色粉末,能溶于熱水,冷卻后成紅棕色溶液,稍溶于醇,并呈棕光品紅色;微溶于丙同。遇過量鹽酸生成棕紫色沉淀;在濃硝酸中呈枯桔黃色;遇氫氧呈深藍色,后變紅色,溶于濃硫酸成藍色溶液,稀釋后生成棕色沉淀。水中溶解度(90℃)為25g/L。染色時遇銅、〖鐵〗時色光影響較大。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)測定水硬度用指示劑,金屬絡合指示劑,測定鈣、鎂、鋇、姻、錳、〖鉛〗、鈧、鍶、〖鋅〗和鋯
〖保存〗:RT
鉻藍R
〖英文名稱〗:Eriochrome blue black R;Mordant Black 17;Acid chrome blue black;Palatine chrome black 6BN;Calcon;Chrome blue black R;Anthracene blue black;Solochrome dark blue
〖其他名稱〗:依來鉻藍R;酸性媒介R;酸性鉻藍R;酸性媒介藍;茜素藍;鉻蘭R;鈣試劑;媒介17;3-羥基-4-(2-羥基-1-萘偶氮)-1-萘磺酸鈉;宮殿染料;鈣紫紅素
〖CAS號〗:2538-85-4
C20H13N2NaO5S=416.39
〖級別〗:IND
靈敏度試驗:合格
乙醇溶解試驗:合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:棕色或深棕色粉末,溶于水和乙醇。水溶液呈紫色溶液,加鹽酸于水溶液中有棕色沉淀,醇溶液為藍紅色,濃硝酸溶液為黃色,氫氧溶液為棗紅色,硫酸液為藍色,用水稀釋析出紅色沉淀。zui大吸收波長569nm。有刺激性
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)絡合指示劑。測定鈣、鎂、鎘、錳和〖鋅〗。熒光分析測鋁。測定水硬度
酸水解酪素 - 混合液
DMEM( 高糖 ) 酚 - - 混合液 (RNA 提取 )
DMEM( 低糖 ) 酚 - - 混合液 (DNA 提取 )
供體馬血清 Earle 溶液
弗氏不*佐劑 杜氏 PBS 緩沖液 ,10×
DH10B 感受態細胞 溴化乙錠干粉 (EB)
XL2-Blue 感受態細胞 SSPE 溶液 ,20×
BL21-CodonPlus(DE3) 感受態細胞 超快蛋白銀染試劑盒
Rosetta 感受態細胞 質譜兼容型蛋白銀染試劑盒
AGL1 農桿菌感受態細胞 BLOTTO 溶液
EHA105 農桿菌感受態細胞 干粉型 SOB 培養基
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