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上海邦景實業有限公司
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單細胞裂解液 （RNA）1mL實驗步驟運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。
單細胞裂解液 (RNA)1mL實驗步驟合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
單細胞裂解液 (RNA)1mL實驗步驟按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現 1.1Kb 的片段（如果使用隨機引物，將出現多個小片段）。
單細胞裂解液 (RNA)1mL實驗步驟產品介紹：
產
單細胞裂解液 (RNA)1mL實驗步驟產品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶，內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提 供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
〖保存〗：RT
間甲基紅
〖英文名稱〗：m-Methyl red；3-((4-(Dimethylamino)phenyl)azo)benzoic acid
〖其他名稱〗：對二甲氨基偶氮苯間羧酸；3-((4-(二甲基氨基)苯基)偶氮)苯甲酸；對二甲氨基苯偶氮苯甲酸
〖CAS號〗：20691-84-3
C15H15N3O2=269.30
〖級別〗：IND
pH變色域：2.0(紅)～4.0(黃)
被溴氧化試驗：合格
乙醇溶解試驗：合格
〖灼燒殘渣〗：≤0.3%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：紅棕色粉末。溶于乙醇，幾乎不溶于水
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)酸堿指示劑
單細胞裂解液 (RNA)1mL實驗步驟LBA4404 農桿菌感受態細胞 *溶液，10mg/mL
AH109 酵母感受態細胞 堿性膠電泳液 ,10×
EGY48 酵母感受態細胞 MDS 42T7lac 菌種
NMY51 酵母感受態細胞 干粉型 LB-Lennox 培養基
Y187 酵母感受態細胞 干粉型 2×YT 培養基
Y2HGold 酵母化學感受態細胞 干粉型 SB 培養基
T1 感受態細胞 干粉型 SOC 培養基
植物 RNA 提取高鹽溶液 干粉型 TB 培養基
克必隆平末端克隆試劑盒（組成型） 自誘導培養基 (lac 啟動子 )
Flemming 固定液 穿刺培養基
Orth 固定液 菌種保存液
BL21 感受態細胞 菌種保存液
M15 感受態細胞 高 pH 緩沖液套裝
OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受態細胞 中 pH 緩沖液套裝
XL10-Gold 感受態細胞 低 pH 緩沖液套裝
非蛋白型 Western 封堵液 5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚磷酸 (BCIP)
腦心浸液 四氮唑藍 (NBT)
哺乳動物雙雜交試劑盒 PMSF 溶液，10mg/mL
柱式石蠟包埋組織 DNAout2.0（二代測序） *抑制劑，10mg/mL
柱式微生物基因組 DNAout *抑制劑溶液，1 mg/mL
單細胞全轉錄組擴增試劑盒 亮抑蛋白酶肽溶液，10 mg/mL
酚 - 混合液 (RNA 提取 ) EDTA 溶液 ,0.5M, 蛋白
nnexin V-PE·7-AAD）
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