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單細(xì)胞全轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增試劑盒 24 次原理

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

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更新時間:2017-01-19 16:03:22瀏覽次數(shù):675次

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產(chǎn)品簡介

單細(xì)胞全轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增試劑盒 24 次原理運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細(xì)介紹

單細(xì)胞全轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增試劑盒 24 次原理產(chǎn)品及特點(diǎn):
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶,內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
單細(xì)胞全轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增試劑盒 24 次原理產(chǎn)品介紹:

合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)R坏?RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標(biāo)記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段(如果使用隨機(jī)引物,將出現(xiàn)多個小片段)。

鄰菲啰啉鹽酸鹽
〖英文名稱〗:o-Phenanthroline hydrochloride 
〖其他名稱〗:1,10-菲啰啉鹽酸鹽;鄰菲羅啉鹽酸鹽;鹽酸鄰菲羅啉;1,10-鄰二氮雜菲鹽酸鹽一水合物;1,10-菲啉鹽酸鹽;1,10-菲咯啉單鹽酸單水合物;苯奈林;鄰菲咯啉單鹽酸單水合物
〖CAS號〗:3829-86-5 
C12H8N2?HCl?H2O=234.68 
〖級別〗:AR
〖含量〗:≥99.5%
對〖鐵〗絡(luò)合物摩爾吸收系數(shù)ε/(L/cm?mol):≥11000
〖干燥失重〗:≤7.8% 
外觀:合格
水溶解試驗(yàn):合格
〖灼燒殘渣〗:≤0.05% 
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:無色或白色結(jié)晶粉末。對光敏感。溶于水和乙醇
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)亞〖鐵〗的光度測定。銀、銅、〖鋅〗、鎘等離子的掩蔽劑。鈀、錳等離子的沉淀劑。指示劑
〖保存〗:RT,避光
玫瑰紅三羧酸銨
〖英文名稱〗:Aluminon;Aurintricarboxylic acid triammonium salt;C.I. 43810
〖其他名稱〗:鋁試劑;玫紅三羧酸銨;5-[(3-羧基-4-羥基苯基)(3-羧基-4-氧代-2,5-環(huán)己二烯-1-亞基)甲基]-2-羥基苯甲酸三〖銨鹽〗;金精三羧酸銨;金紅*酸銨;2-(亞水楊基氨基)酚;水楊叉鄰氨基酚;水楊縮鄰氨基酚
〖CAS號〗:569-58-4 

小鼠抗 Trx 標(biāo)簽蛋白單抗     電泳尿素
兔抗山羊 IgG(H+L),辣根過氧化物酶標(biāo)記    DNA 尿素 -PAGE 上樣液
山羊抗小鼠 IgG(H+L),異硫氰酸熒光素標(biāo)記    DNA 尿素 -PAGE 上樣液
山羊抗小鼠 IgG(H+L),異硫氰酸熒光素標(biāo)記    DNA 非變性 PAGE 上樣液
山羊抗兔 IgG(H+L),異硫氰酸熒光素標(biāo)記    DNA 非變性 PAGE 上樣液
山羊抗兔 IgG(H+L),異硫氰酸熒光素標(biāo)記    電泳甲叉雙丙烯酰胺 
基因轉(zhuǎn)染增強(qiáng)劑    Western 印跡膜封膜液 ( 尼龍膜 )
雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-EGFP·PI)    電泳過硫酸銨
雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-EGFP·PI)    電泳 TEMED
雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-PE·7-AAD)     SDS 溶液 ,10%,電泳
雙染細(xì)胞凋亡


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