天凈沙單細(xì)胞 RNA 擴(kuò)增試劑盒80 次實(shí)驗(yàn)方法

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  核酸擴(kuò)增產(chǎn)品

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即用型PCR

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

天凈沙單細(xì)胞 RNA 擴(kuò)增試劑盒80 次實(shí)驗(yàn)方法運(yùn)輸及保存低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細(xì)介紹

天凈沙單細(xì)胞 RNA 擴(kuò)增試劑盒80 次實(shí)驗(yàn)方法合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長(zhǎng)度成反比。 RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對(duì)富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
天凈沙單細(xì)胞 RNA 擴(kuò)增試劑盒80 次實(shí)驗(yàn)方法按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對(duì)照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標(biāo)記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測(cè)。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機(jī)引物，將出現(xiàn)多個(gè)小片段）。

產(chǎn)品介紹：

產(chǎn)品及特點(diǎn):

本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長(zhǎng) cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長(zhǎng)可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。

C22H23N3O9=473.44
〖級(jí)別〗：AR
靈敏度試驗(yàn)：合格
溶解試驗(yàn)：合格
〖灼燒殘?jiān)剑?le;0.2%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：黃棕色或棕紅色粉末。易溶于水,微溶于乙醇,幾乎不溶于乙迷、丙同和氯方。〖熔點(diǎn)〗220～225℃(分解)。zui大吸收波長(zhǎng) 522(450)nm。
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)測(cè)定水、食物及組織中的鋁。光度測(cè)定鋁、鈹和氟化物、鎵、鈧。用于鋁的紙色譜
〖保存〗：RT，避光
玫瑰紅6G
〖英文名稱〗：Rhodamine 6G；Basic Red 1；Rhodamine 590；Rhodamine 6GX；6GDN；Rhodyle 4G；Brilliant pink 5G；Calcozine red 6G extra；C.I. 45160
〖其他名稱〗：羅丹明6G；羅丹明590；蕊香紅6G；若丹明6G；黃光堿性蕊香紅；堿性紅1；9-[2-(乙氧羰基)苯基]-3,6-二(乙氨基)-2,7-二甲基氯化占噸翁；染料索引45160
〖CAS號(hào)〗：989-38-8
C28H31ClN2O3=479.02
〖級(jí)別〗：BS
生物染色試驗(yàn)：合格
水溶性試驗(yàn)：合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：紅色或黃棕色粉末。溶于水呈猩紅色帶綠色熒光；溶于醇呈紅色帶黃色熒光或黃紅色帶綠色熒光。〖熔點(diǎn)〗290℃

雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V-APC·7-AAD）    RNase-free 異硫氰酸胍溶液 ,5M
雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V-APC·7-AAD）    IPTG 干粉
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V-APC）   X-Gal 干粉
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V-APC）   RNase-free Sarkosyl 溶液 ,10%
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V-PE）   DNA 異硫氰酸胍溶液，5M
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V-PE）   AFLP 試劑盒 (EcoRI-MseI)
雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V- 熒光素 488·PI）    RNase-free 鹽酸胍溶液 ,8M
雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V- 熒光素 488·PI）    RNase-free 氯化鋰溶液 ,10M
雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V- 熒光素 555·7-AAD）   一站式*期 SDS-PAGE 電泳套裝 (>30KD)
雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V- 熒光素 555·7-AAD）   一站式*期 SDS-PAGE 電泳套裝 (2-30KD)
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V- 熒光素 594）   *期 SDS-PAGE 配膠液
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V- 熒光素 594）   *期 SDS-PAGE 還原劑
D-Hanks 溶液

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