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天凈沙通用型MLPA 試劑盒20 次實驗步驟

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更新時間:2017-01-19 16:01:31瀏覽次數:935次

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產品簡介

天凈沙通用型MLPA 試劑盒20 次實驗步驟運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細介紹

天凈沙通用型MLPA 試劑盒20 次實驗步驟產品介紹:

天凈沙通用型MLPA 試劑盒20 次實驗步驟產品及特點:

本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。

合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。

〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)利用生成離子締合物,熒光和光度法測定金屬離子;吸附指示劑;生物染色劑
〖保存〗:RT,避光
玫紅酸
〖英文名稱〗:Rosolic acid;Aurine;Corallin;p-Rosolic acid;Pararosolic acid 
〖其他名稱〗:玫瑰紅酸;樹脂質酸;薔薇色酸;金紅;薔薇酸;枚紅酸
〖CAS號〗:603-45-2 
C19H14O3=290.32
〖級別〗:AR
pH變色域:6.8(黃)~8.0(紅)
靈敏度試驗:合格
乙醇溶解試驗:合格
〖灼燒殘渣〗(以〖硫酸鹽〗計):≤0.2%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:深紅色結晶,有金屬光澤。也有帶深綠色金屬樣的黃棕色片。易溶于乙醇呈金黃色溶液,溶于氫氧或氫氧的水或乙醇溶液呈胭脂紅色,溶于濃硫酸、70%硫酸、鹽酸或高氯酸呈黃色至橙色,略溶于冰乙酸,微溶于乙迷和氯方,幾乎不溶于水(0.12%)和苯。在真空中加熱到180℃不揮發。zui大吸收波長(氫氧液)534.6、479.5nm。有刺激性。〖熔點〗308-310℃(同時分解)

雙染細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V- 熒光素 647·7-AAD)    *期 SDS-PAGE 上樣液
雙染細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V- 熒光素 647·7-AAD)    *期 SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )(>30KD)
活/死細胞染色試劑盒(Calcein AM·PI)    *期 SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )(2-30KD)
熒光法死細胞檢測試劑盒    柱式動物 RNA-DNA 雙提試劑盒
MTS 細胞增殖與細胞毒性檢測試劑盒    DNA  Sarkosyl 溶液,10%
XTT 細胞增殖與細胞毒性檢測試劑盒    SDS-PAGE 預制膠
Caspase 2 檢測試劑盒    蝸牛酶干粉
Caspase 3 檢測試劑盒    消解酶 ( 溶細胞酶 ) 干粉
Caspase 4 檢測試劑盒     *標記 dUTP 溶液
Caspase 6 檢測試劑盒     標記 dUTP 溶液
Caspase 8 檢測試劑盒     亞硫酸氫鹽 DNA 修飾試劑盒
Caspase 9 檢測試劑盒     甲基化專一性 PCR 試劑盒
Caspase 1 檢測試劑盒     麗春紅 S 染膜液
TB1 感受態細胞    


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