GTP 溶液，2.5mM2mL實(shí)驗(yàn)方法

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更新時(shí)間：2017-01-19 15:58:52瀏覽次數(shù)：411次

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產(chǎn)品分類 品牌分類

  核酸擴(kuò)增產(chǎn)品

常用PCR引物

種屬鑒定PCR Mix

單細(xì)胞擴(kuò)增

其他擴(kuò)增試劑盒

LAMP擴(kuò)增

全基因組擴(kuò)增（WGA）

即用型RT-PCR

RT

即用型PCR

PCR成分及添加劑

全部產(chǎn)品列表

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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

GTP 溶液，2.5mM2mL實(shí)驗(yàn)方法運(yùn)輸及保存低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細(xì)介紹

GTP 溶液，2.5mM2mL實(shí)驗(yàn)方法產(chǎn)品及特點(diǎn):
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長(zhǎng) cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長(zhǎng)可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫(kù)構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
GTP 溶液，2.5mM2mL實(shí)驗(yàn)方法產(chǎn)品介紹：

合成建文庫(kù)用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長(zhǎng)度成反比。 RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對(duì)富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對(duì)照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標(biāo)記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測(cè)。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機(jī)引物，將出現(xiàn)多個(gè)小片段）。

鄰苯二酚紫
〖英文名稱〗：Pyrocatechol violet；Catecholsulfonphthalein；Pyrocatecholsulfonephthalein；Catechol violet
〖其他名稱〗：兒茶酚紫；鄰苯二酚磺酞；焦兒茶酚紫；兒茶酚磺酞；二茶酚紫；鄰二酚磺酞
〖CAS號(hào)〗：115-41-3
C19H14O7S=386.38
〖級(jí)別〗：IND
溶解試驗(yàn)：合格
〖干燥失重〗：≤0.5%
〖灼燒殘?jiān)?以〖硫酸鹽〗計(jì))：≤0.1%
PH變色域：5.2（黃）～6.8（紫）
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：紅棕色結(jié)晶粉末，有金屬光澤。易溶于水和乙醇，微溶于無(wú)水乙醇，不溶于非極性溶劑(如醚、苯、二甲苯)。其水溶液呈黃色，當(dāng)〖酸度〗增加時(shí)則由黃變紅，pH6以上溶液變?yōu)樽仙琾H9以上變?yōu)榧t紫色
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)絡(luò)合指示劑。滴定鉍、鎘、鈷、銅、〖鐵〗、鎵、銦、鎂、〖鉛〗、錳、〖鎳〗、釷、〖鋅〗。用于鉍、硼、鉻(III)、銅、鈮、銻、錫、鋯、釷的光度測(cè)定。紙色譜的噴顯劑
〖保存〗：RT
比布里希猩紅
〖英文名稱〗：Acid red 66；Biebrich scarlet WS； Ponceau BS；C.I. 26905；Biebrich Scarlet；Sodium 6-(2-hydroxynaphthylazo)-3,4'-azodibenzenesulfonate

10 μL RNase-free 白吸頭 ( 盒裝 )   玻璃勻漿器 ,10mL
HinfI    3'-RACE 試劑盒
10 μL RNase-free 白吸頭 ( 盒裝長(zhǎng)尖 )   5'-RACE 試劑盒
KpnI   沉淀型 TMB 顯色試劑盒
10 μL RNase-free 白吸頭 ( 盒裝已滅菌 )   DNA CTAB 溶液，20%
Mlu   柱式糞便 RNAout
10 μL RNase-free 白吸頭 ( 盒裝已滅菌長(zhǎng)尖 )   柱式軟體動(dòng)物 DNAout
MboI   柱式水樣 DNAout
10 μL RNase-free 白吸頭 ( 盒裝已滅菌帶芯 )   柱式軟體 RNAout
NcoI   通用型 RT-LAMP 試劑盒
5.2，3M
1000 μL RNase-free 藍(lán)吸頭 ( 袋裝 )   DNA Tris HCl，1M，pH6.5

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