NTP 溶液，10mM0.5mL實(shí)驗(yàn)步驟

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  核酸擴(kuò)增產(chǎn)品

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即用型PCR

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

NTP 溶液，10mM0.5mL實(shí)驗(yàn)步驟運(yùn)輸及保存低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細(xì)介紹

NTP 溶液，10mM0.5mL實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品介紹：

NTP 溶液，10mM0.5mL實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):

本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長(zhǎng) cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長(zhǎng)可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫(kù)構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。

合成建文庫(kù)用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長(zhǎng)度成反比。 RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對(duì)富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對(duì)照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標(biāo)記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測(cè)。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機(jī)引物，將出現(xiàn)多個(gè)小片段）。

〖保存〗：2～8℃
香豆素
〖英文名稱〗：Coumarin；1,2-Benzopyrone；5,6-Benzo-2-pyrone；cis-o-Coumarinic acid lactone；Coumarinic anhydride；Tonka bean camphor
〖其他名稱〗：香豆內(nèi)酯；1,2-苯并哌哢；氧雜萘鄰?fù)秽徰踺镣槐讲⑧徰踯煌?,2-苯并吡喃酮；2H-1-苯并吡喃-2-酮
〖CAS號(hào)〗：91-64-5
C9H6O2=146.14
〖級(jí)別〗：AR
〖含量〗：≥98.0%
〖熔點(diǎn)〗：68～70℃
乙醇溶解試驗(yàn)：合格
〖灼燒殘?jiān)剑?le;0.1%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：無(wú)色斜方或長(zhǎng)方晶體或粉末。有香莢蘭豆香，有灼燒味，味苦。溶于乙醇、乙迷、氯方、揮發(fā)油和氫氧化堿溶液中，微溶于沸水。〖相對(duì)密度〗(d204)0.935。〖熔點(diǎn)〗68～70℃。沸點(diǎn)297～299℃。閃點(diǎn)162℃。

紅細(xì)胞 NADH 高鐵血紅蛋白還原酶測(cè)試盒   植物線粒體純化試劑盒 ( 粗提 )
琥珀酸脫氫酶測(cè)試盒   植物線粒體純化試劑盒 ( 精提 )
活性氧 ( 羥自由基 ) 測(cè)試盒 ( 比色法 )   宿主細(xì)胞系列
活性氧檢測(cè)試劑盒   *瓊脂糖
肌酸激酶測(cè)試劑盒   超敏化學(xué)發(fā)光 (HRP) 檢測(cè)試劑盒（ECL）
堿性磷酸酶測(cè)試劑盒   超敏化學(xué)發(fā)光 (HRP) 檢測(cè)試劑盒（ECL）
堿性磷酸酶測(cè)試劑盒   血液保存和 DNA 純化套裝
抗離子酸性磷酸酶檢測(cè)試劑盒   SP6 RNA 聚合酶
抗酒石酸酸性磷酸酶檢測(cè)試劑盒   SP6 RNA 聚合酶
葡萄糖 -6- 磷

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