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G（5´）ppp（5´）G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD原理

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更新時間：2017-01-19 15:48:09瀏覽次數(shù)：343次

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  核酸擴增產(chǎn)品

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產(chǎn)品簡介

G（5´）ppp（5´）G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD原理運輸及保存低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細介紹

G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD原理產(chǎn)品介紹：

G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD原理產(chǎn)品及特點:

本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標記等。

G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD原理合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD原理按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機引物，將出現(xiàn)多個小片段）。

〖CAS號〗：16423-68-0或568-63-8
C20H6I4Na2O5=879.88
〖級別〗：IND
〖含量〗（干品計）：≥80.0%
靈敏度試驗：合格
水溶解試驗：合格
〖干燥失重〗：≤8.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：棕色粉末。溶于水溶液呈櫻紅色，溶于乙醇。加鹽酸于水液中析出黃棕色沉淀，加氫氧生成紅色沉淀，但能溶于過量試劑中。zui大吸收波長(水中)524nm、(95％乙醇中) 531nm。
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)沉淀滴定的吸附指示劑。酸堿滴定熒光指示劑，pH大于2.5無熒光，pH不小于4.0呈淺綠色熒光。光度測定試劑。生物染色劑
〖保存〗：RT，避光
隱色結(jié)晶紫
〖英文名稱〗：LCV；Leucocrystal Violet； 4,4',4''-Methylidynetris(N,N-dimethylaniline)；Leuco Crystal Violet
〖其他名稱〗：隱性結(jié)晶紫；無色結(jié)晶紫；退色結(jié)晶紫；三(對二甲氨基苯基)甲烷
〖CAS號〗：603-48-5
C25H31N3=373.53
〖級別〗：BR
〖含量〗：≥99.0%
〖熔點〗：175～180℃
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：白色至灰白色或淡紫色粉末。溶于甲醇（C=0.01g/L in 0.1N HC1 in methanol）。
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)使用前，在P2O5干燥器中干燥48小時以上，以除去水分。使用時應(yīng)注意防護，避免吸入或與皮膚接觸。產(chǎn)品開封后，應(yīng)盡快恢復(fù)密封狀態(tài)，在規(guī)定條件下〖保存〗
〖保存〗：RT，避光
隱色孔雀石綠
〖英文名稱〗：Leucomalachite Green；4,4′-Benzylidenebis(N,N-dimethylaniline)
〖其他名稱〗：無色孔雀石綠；隱性孔雀石綠；二(對二甲氨基苯基)苯基甲烷；隱色孔雀綠；P,P'-亞芐雙-N,N-二甲苯胺；還原孔雀綠；P,P'-亞芐雙-N,N'二甲胺苯
〖CAS號〗：129-73-7
C23H26N2=330.47

G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD原理唾液酸測試盒 ( 帶 SA 標準 )   柱式植物葉綠體 DNAout
微量丙二醛測試盒 / 脂質(zhì)過氧化物測試盒   S1 核酸酶
維生素 C 測試盒   綠豆核酸酶
*測試盒   BAL31 核酸酶
一氧化氮合成酶測試盒   核酸外切酶 I
一氧化氮檢測試劑盒 ( 化學(xué)法 )   T4 DNA 聚合酶
一氧化氮檢測試劑盒 ( 硝酸還原酶法 )   微球菌核酸酶
乙酰*酯酶測試盒   核糖核酸酶 H
乙酰*轉(zhuǎn)移酶測試盒   DNA 拓撲異構(gòu)酶 I
抑制與產(chǎn)生超氧陰離子自由基測試盒 ( 比色法 )   終點顯色法內(nèi)毒素定量試劑盒
游離脂肪酸測試盒   大腸桿菌 DNA 連接酶
脂褐質(zhì)測試盒   核酸外切酶 III
檢測試劑盒 (ABTS 法 )   Xa 因子蛋白酶
   dTTP 溶液，1