G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類(lèi)似物25 OD原理產(chǎn)品介紹:

G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類(lèi)似物25 OD原理產(chǎn)品及特點(diǎn):
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長(zhǎng) cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶,內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長(zhǎng)可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專(zhuān)一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫(kù)構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類(lèi)似物25 OD原理合成建文庫(kù)用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)R坏?RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專(zhuān)一性引物 100 pmol 注意:隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長(zhǎng)度成反比。 RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對(duì)富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類(lèi)似物25 OD原理按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對(duì)照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標(biāo)記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測(cè)。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段(如果使用隨機(jī)引物,將出現(xiàn)多個(gè)小片段)。
〖CAS號(hào)〗:16423-68-0或568-63-8
C20H6I4Na2O5=879.88
〖級(jí)別〗:IND
〖含量〗(干品計(jì)):≥80.0%
靈敏度試驗(yàn):合格
水溶解試驗(yàn):合格
〖干燥失重〗:≤8.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:棕色粉末。溶于水溶液呈櫻紅色,溶于乙醇。加鹽 酸于水液中析出黃棕色沉淀,加氫氧生成紅色沉淀,但能溶于過(guò)量試劑中。zui大吸收波長(zhǎng)(水中)524nm、(95%乙醇中) 531nm。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)沉淀滴定的吸附指示 劑。酸堿滴定熒光指示劑,pH大于2.5無(wú)熒光,pH不小于4.0呈淺綠色熒光。光度測(cè)定試劑。生物染色劑
〖保存〗:RT,避光
隱色結(jié)晶紫
〖英文名稱(chēng)〗:LCV;Leucocrystal Violet; 4,4',4''-Methylidynetris(N,N-dimethylaniline);Leuco Crystal Violet
〖其他名稱(chēng)〗:隱性結(jié)晶紫;無(wú)色結(jié)晶紫;退色結(jié)晶紫;三(對(duì)二甲氨基苯基)甲烷
〖CAS號(hào)〗:603-48-5
C25H31N3=373.53
〖級(jí)別〗:BR
〖含量〗:≥99.0%
〖熔點(diǎn)〗:175~180℃
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:白色至灰白色或淡紫色粉末。溶于甲醇(C=0.01g/L in 0.1N HC1 in methanol)。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)使用前,在P2O5干燥器中干燥48小時(shí)以上,以除去水分。使用時(shí)應(yīng)注意防護(hù),避免吸入或與皮膚接觸。產(chǎn)品開(kāi)封后,應(yīng)盡快恢復(fù)密封狀態(tài),在規(guī)定條件下〖保存〗
〖保存〗:RT,避光
隱色孔雀石綠
〖英文名稱(chēng)〗:Leucomalachite Green;4,4′-Benzylidenebis(N,N-dimethylaniline)
〖其他名稱(chēng)〗:無(wú)色孔雀石綠;隱性孔雀石綠;二(對(duì)二甲氨基苯基)苯基甲烷;隱色孔雀綠;P,P'-亞芐雙-N,N-二甲苯胺;還原孔雀綠;P,P'-亞芐雙-N,N'二甲胺苯
〖CAS號(hào)〗:129-73-7
C23H26N2=330.47
G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類(lèi)似物25 OD原理唾液酸測(cè)試盒 ( 帶 SA 標(biāo)準(zhǔn) ) 柱式植物葉綠體 DNAout
微量丙二醛測(cè)試盒 / 脂質(zhì)過(guò)氧化物測(cè)試盒 S1 核酸酶
維生素 C 測(cè)試盒 綠豆核酸酶
*測(cè)試盒 BAL31 核酸酶
一氧化氮合成酶測(cè)試盒 核酸外切酶 I
一氧化氮檢測(cè)試劑盒 ( 化學(xué)法 ) T4 DNA 聚合酶
一氧化氮檢測(cè)試劑盒 ( 硝酸還原酶法 ) 微球菌核酸酶
乙酰*酯酶測(cè)試盒 核糖核酸酶 H
乙酰*轉(zhuǎn)移酶測(cè)試盒 DNA 拓?fù)洚悩?gòu)酶 I
抑制與產(chǎn)生超氧陰離子自由基測(cè)試盒 ( 比色法 ) 終點(diǎn)顯色法內(nèi)毒素定量試劑盒
游離脂肪酸測(cè)試盒 大腸桿菌 DNA 連接酶
脂褐質(zhì)測(cè)試盒 核酸外切酶 III
檢測(cè)試劑盒 (ABTS 法 ) Xa 因子蛋白酶
dTTP 溶液,1