G（5´）ppp（5´）A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD實驗方法

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更新時間：2017-01-19 15:47:23瀏覽次數(shù)：360次

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產(chǎn)品分類 品牌分類

  核酸擴(kuò)增產(chǎn)品

常用PCR引物

種屬鑒定PCR Mix

單細(xì)胞擴(kuò)增

其他擴(kuò)增試劑盒

LAMP擴(kuò)增

全基因組擴(kuò)增（WGA）

即用型RT-PCR

RT

即用型PCR

PCR成分及添加劑

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上海邦景實業(yè)有限公司

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產(chǎn)品簡介

G（5´）ppp（5´）A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD實驗方法運(yùn)輸及保存低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細(xì)介紹

G(5´)ppp(5´)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD實驗方法產(chǎn)品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
G(5´)ppp(5´)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD實驗方法產(chǎn)品介紹：

G(5´)ppp(5´)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD實驗方法合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
G(5´)ppp(5´)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD實驗方法按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標(biāo)記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機(jī)引物，將出現(xiàn)多個小片段）。

〖級別〗：Analytical standard
〖含量〗：≥98.0%（HPLC）
〖熔點〗：100～102℃
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：白色至棕褐色或淡藍(lán)色或淡綠色粉末。是孔雀石綠的酸性還原物,含有一定量的〖鋅〗鹽。對光敏感。空氣中易氧化。易溶于苯、甲苯、乙迷,溶于乙醇,微溶于石油英,不溶于水。〖熔點〗102℃(94℃)。沸點(分解)。zui大吸收波長623nm
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)酸堿指示劑。顯色劑。檢定鈰、銥、〖鐵〗化物。金的光度測定。痕量錳的催化光度測定。使用前，在P2O5干燥器中干燥48小時以上，以除去水分。使用時應(yīng)注意防護(hù)，避免吸入或與皮膚接觸。產(chǎn)品開封后，應(yīng)盡快恢復(fù)密封狀態(tài)，在規(guī)定條件下〖保存〗
〖保存〗：RT，避光
石炭酸復(fù)紅
〖英文名稱〗：Carbol fuchsin
〖其他名稱〗：石炭酸品紅；卡寶品紅；酚品紅；哥瑞母氏石碳酸品紅；石碳酸品紅；*品紅
〖CAS號〗：4197-24-4
〖級別〗：IND
紅外光譜〖鑒別〗：合格
紫外光譜：合格
λmax（in water)：約542 nm
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：粉末為暗綠色至褐色粉末，液體為暗綠色至褐色液體，是*與堿性品紅的混合物，對光和空氣敏感。zui大吸收波長547nm。粉末應(yīng)用時溶于乙醇后，再加蒸餾水稀釋
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)生物染色劑，用于結(jié)核桿菌染色和其他抗酸性桿菌染色。
〖保存〗：RT，避光
亮藍(lán)
〖英文名稱〗：Erioglaucine disodium salt；Acid Blue 9；Alphazurine FG；C.I. Food Blue 2；C.I. 42090

G(5´)ppp(5´)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD實驗方法脂質(zhì)氧化 (MDA) 檢測試劑盒   T4 RNA 連接酶
總 SOD 活性檢測試劑盒 (NBT 法 )   柱式動物線粒體 DNAout，測序
總 SOD 活性檢測試劑盒 (WST 法 )   柱式藻類 RNAout
總*過氧化物酶檢測試劑盒   大提柱式藻類 RNAout
總*檢測試劑盒   Dam 甲基轉(zhuǎn)移酶
總抗氧化能力測試盒 ( 比色法 )   T4 聚核苷酸激酶
總抗氧化能力

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