m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD原理產(chǎn)品介紹:

m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD原理產(chǎn)品及特點(diǎn):
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長(zhǎng) cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶,內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長(zhǎng)可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫(kù)構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD原理合成建文庫(kù)用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)R坏?RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長(zhǎng)度成反比。 RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對(duì)富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD原理按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對(duì)照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標(biāo)記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測(cè)。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段(如果使用隨機(jī)引物,將出現(xiàn)多個(gè)小片段)。
〖CAS號(hào)〗:3147-14-6
C17H14N2O5S=358.37
〖級(jí)別〗:IND
〖熔點(diǎn)〗:≥330℃
UV absorption:λmax 605~615nm
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:暗褐色或色結(jié)晶粉末,不溶于水
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)在用EDTA滴定Ca、Mg金屬離子時(shí)作為指示劑
〖保存〗:RT
吖啶紅
〖英文名稱〗:Acridine red;Dimethyl diaminoxanthenyl chloride;C.I.45000
〖其他名稱〗:二甲基二氨基呫噸基氯;氯化二甲基二氨基呫噸;丫啶紅
〖CAS號(hào)〗:2465-29-4
C15H15ClN2O=274.75
〖級(jí)別〗:Chroma
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:灰褐色或色粉末或紅色粉末。溶于水和乙醇,水溶液和乙醇溶液呈紅色并帶黃綠色熒光。遇濃硫酸呈綠色熒光,稀釋后溶液呈橙色至紅色,水溶液加氫氧產(chǎn)生黃色沉淀
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)檢查組織中鈣鹽沉積和磷酸酶活動(dòng)范圍
m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD原理F12K 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 ) 大腸桿菌零誘導(dǎo)培養(yǎng)基
HAT 篩選培養(yǎng)基 OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞
HT 篩選培養(yǎng)基 柱式血液 DNA-RNAout
IMDM 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 ) 兔抗 GST 標(biāo)簽多抗
IMDM 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 ) HRP 標(biāo)記的兔抗 GST 標(biāo)簽多抗
L-15 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 ) 革氏陽(yáng)性細(xì)菌質(zhì)粒 DNAout
McCoy's5A 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 ) X 光片 (5×7 英寸 )
McCoy's5A 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 ) X 光片 (8×10 英寸 )
MEM 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 ) 暗盒 (5×7 英寸 )
MEM 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 ) 暗盒 (8×10 英寸 )
PRMI1640 培養(yǎng)基 dATP 溶液,100mM
PRMI1640 培養(yǎng)基 ( 含