環(huán)狀 DNA 全基因組擴增試劑盒30 次說明書

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更新時間：2017-01-19 15:21:53瀏覽次數：463次

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產品簡介

環(huán)狀 DNA 全基因組擴增試劑盒30 次說明書運輸及保存低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細介紹

環(huán)狀 DNA 全基因組擴增試劑盒30 次說明書合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
環(huán)狀 DNA 全基因組擴增試劑盒30 次說明書按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現 1.1Kb 的片段（如果使用隨機引物，將出現多個小片段）。

產品介紹：

產品及特點:

本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶，內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。

茚三酮
〖英文名稱〗：Ninhydrin；1,2,3-Indantrione hydrate；2,2-Dihydroxyinden-1,3-dione；2,2-Dihydroxy-1H-indene-1,3(2H)-dione；Triketohydrindene hydrate；Trioxohydrindene monohydrate
〖其他名稱〗：苯并戊三酮；水合茚三酮；苯駢戊三酮；苯并環(huán)丙三酮；2,2-二羥基-1H-茚并-1,3(2H)-二酮；水合三酮氫茚；寧海群
〖CAS號〗：485-47-2
C9H6O4=178.14
〖級別〗：AR
〖含量〗：≥98.0%
水溶解試驗：合格
對氨基酸靈敏度試驗：合格
〖灼燒殘渣〗：≤0.1%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：白色或淺黃色結晶或結晶性粉末。能吸濕結塊。見光或露置空氣中逐漸變色。在125℃變紅，139℃體積膨脹，241℃分解。溶于水和乙醇，微溶于乙迷和氯方。
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)測定蛋白質及肽的游離氨基及羧酸。

L-Arginine(NO 前體 )   EHA103 農桿菌菌種
L-Canavanine(iNOS 抑制劑 )   GV3101 農桿菌菌種
L-Citrulline(NO 中間體 )   BL21 菌種
Leptomycin B( 出核轉運抑制劑 )   BJ5183 菌種
L-Glutathione (reduced form)( 抗氧化劑 )   Y187 酵母菌種
Lipoic acid( 抗氧化劑 )   Y2HGold 酵母菌種
L-NAME(eNOS 抑制劑 )   EGY48 酵母菌種
L-NMMA( 總 NOS 抑制劑 )   NMY51 酵母菌種
Lovastatin(HMG-CoA Reductase 抑制劑 )   *0F' 菌種
LPS(TLR4 激活劑 )   Rosetta-gami B(DE3) 菌種
LY294002(PI3K 抑制劑 )   Origami B 菌種
Metformin(LKB1-AMPK 激活劑 )   SMD1168H 酵母菌種
MG-132(Proteasome 抑制劑 )   WB600 枯草宿主菌菌種
Monensin ( 蛋白轉運抑制劑 )   MG1655 菌種
NAC( 抗氧化劑 )   DH10Bac 菌種
KC 激活劑 )