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上海邦景實業有限公司
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石蠟包埋組織全基因組擴增試劑盒30 次實驗方法運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。
石蠟包埋組織全基因組擴增試劑盒30 次實驗方法產品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
石蠟包埋組織全基因組擴增試劑盒30 次實驗方法產品介紹:
合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。
〖英文名稱〗:TBAHS;IPC-TBA-HS;Tetrabutylammoniumhydrogen sulfate
〖其他名稱〗:硫酸氫四丁銨;四丁基硫氫酸銨;正四丁基硫酸氫基銨;四丁基酒石酸氫銨;硫酸氫化四丁基
〖CAS號〗:32503-27-8
C16H37NSO4=339.53
〖級別〗:Chromatography grade
〖含量〗:≥99.0%
〖熔點〗:167~172℃
〖干燥失重〗:≤0.4%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:白色半透明結晶。易吸濕。〖熔點〗 169~171℃。有刺激性。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)離子對色譜試劑。相轉移催化劑。
〖保存〗:RT
4,4-雙(二甲氨基)硫代二苯甲酮
〖英文名稱〗:Thiomichler's ketone;4,4′-Bis(dimethylamino)thiobenzophenone;4,4′-Tetramethyldiaminothiobenzophenone;p,p′-Tetramethyldiaminoth- iobenzophenone
〖其他名稱〗:4,4-雙(二甲氨基)硫代二甲酮;硫代米氏酮;4,4′-四甲基二氨基硫代二苯甲酮;對,對′-四甲基二氨基二苯硫酮;4,4′-雙(二甲氨基)硫代二苯甲酮;4,4'-雙二甲氨基硫代二苯甲酮;硫代米蚩酮;雙[4-(二甲氨基)苯基]甲硫酮;4,4'-雙(二甲胺基)硫代苯甲酮
〖CAS號〗:1226-46-6
C17H20N2S=284.42
〖級別〗:AR
〖熔點〗:201~206℃
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:深紅色結晶。易溶于熱乙醇、苯和乙酸,溶于鹽酸中呈深藍色,溶于氯方中呈深紅色,不溶于石油醚和水。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)測定金、鈀、鉑、汞、銀、銅的光度試劑。
Pyrrolidinedithioca rbamin acid.ammonium salt(NF-kB 抑制劑 / 抗氧化劑 ) C600 菌種
Rapamycin(FRAP/mTOR 抑制劑 ) DB3.1 菌種
SB203580(p38MAPK 抑制劑 ) DH5αλpir 菌種
Simvastatin(HMG-CoA Reductase 抑制劑 ) ER2566 菌種
S-Methyl-ITU.sulfate(iN0S 抑制劑 ) ER2529 菌種
SMT(iNOS 抑制劑 ) ER2738 菌種
SNP(NO 供體 ) JF1125 菌種
SOD( 抗氧化酶 ) JM101 菌種
Sodium Butyrate(HDAC 抑制劑 ) JM103 菌種
Sodium orthovanadate( 磷酸酯酶抑制劑 ) JM105 菌種
cDNA 合成試劑盒
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