石蠟包埋組織全基因組擴增試劑盒30 次實驗方法

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更新時間：2017-01-19 15:19:39瀏覽次數(shù)：328次

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  核酸擴增產(chǎn)品

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即用型RT-PCR

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即用型PCR

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上海邦景實業(yè)有限公司

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產(chǎn)品簡介

石蠟包埋組織全基因組擴增試劑盒30 次實驗方法運輸及保存低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細(xì)介紹

石蠟包埋組織全基因組擴增試劑盒30 次實驗方法產(chǎn)品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
石蠟包埋組織全基因組擴增試劑盒30 次實驗方法產(chǎn)品介紹：

合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標(biāo)記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機引物，將出現(xiàn)多個小片段）。

〖英文名稱〗：TBAHS；IPC-TBA-HS；Tetrabutylammoniumhydrogen sulfate
〖其他名稱〗：硫酸氫四丁銨；四丁基硫氫酸銨；正四丁基硫酸氫基銨；四丁基酒石酸氫銨；硫酸氫化四丁基
〖CAS號〗：32503-27-8
C16H37NSO4=339.53
〖級別〗：Chromatography grade
〖含量〗：≥99.0%
〖熔點〗：167～172℃
〖干燥失重〗：≤0.4%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：白色半透明結(jié)晶。易吸濕。〖熔點〗 169～171℃。有刺激性。
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)離子對色譜試劑。相轉(zhuǎn)移催化劑。
〖保存〗：RT
4，4-雙（二甲氨基）硫代二苯甲酮
〖英文名稱〗：Thiomichler's ketone；4,4′-Bis(dimethylamino)thiobenzophenone；4,4′-Tetramethyldiaminothiobenzophenone；p,p′-Tetramethyldiaminoth- iobenzophenone
〖其他名稱〗：4,4-雙(二甲氨基)硫代二甲酮；硫代米氏酮；4,4′-四甲基二氨基硫代二苯甲酮；對,對′-四甲基二氨基二苯硫酮；4,4′-雙(二甲氨基)硫代二苯甲酮；4,4'-雙二甲氨基硫代二苯甲酮；硫代米蚩酮；雙[4-(二甲氨基)苯基]甲硫酮；4,4'-雙(二甲胺基)硫代苯甲酮
〖CAS號〗：1226-46-6
C17H20N2S=284.42
〖級別〗：AR
〖熔點〗：201～206℃
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：深紅色結(jié)晶。易溶于熱乙醇、苯和乙酸，溶于鹽酸中呈深藍色，溶于氯方中呈深紅色，不溶于石油醚和水。
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)測定金、鈀、鉑、汞、銀、銅的光度試劑。

Pyrrolidinedithioca rbamin acid.ammonium salt(NF-kB 抑制劑 / 抗氧化劑 )   C600 菌種
Rapamycin(FRAP/mTOR 抑制劑 )   DB3.1 菌種
SB203580(p38MAPK 抑制劑 )   DH5αλpir 菌種
Simvastatin(HMG-CoA Reductase 抑制劑 )   ER2566 菌種
S-Methyl-ITU.sulfate(iN0S 抑制劑 )   ER2529 菌種
SMT(iNOS 抑制劑 )   ER2738 菌種
SNP(NO 供體 )   JF1125 菌種
SOD( 抗氧化酶 )   JM101 菌種
Sodium Butyrate(HDAC 抑制劑 )   JM103 菌種
Sodium orthovanadate( 磷酸酯酶抑制劑 )   JM105 菌種
cDNA 合成試劑盒

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