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通用型全基因組擴增試劑盒30 次說明書

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更新時間:2017-01-19 15:17:29瀏覽次數:423次

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產品簡介

通用型全基因組擴增試劑盒30 次說明書運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細介紹

通用型全基因組擴增試劑盒30 次說明書產品介紹:

通用型全基因組擴增試劑盒30 次說明書產品及特點:

本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。

合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。

〖熔點〗:89~91℃
苯中溶解試:合格
〖灼燒殘渣〗:≤0.1%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:有酮式和烯醇式兩種異構體。烯醇式為淺黃色或黃色立方結晶或粉末。久置,烯醇式結構部分轉變為白色結晶的酮式結構。在極性溶劑中亦會逐漸轉變成酮式。溶于甲醇、乙醇、乙迷、甲烷和苯等有機溶劑,在堿性溶液中,能生成鹽而溶解,不溶于水或酸性溶液。〖熔點〗(烯醇式) 86~88℃(92℃)、(酮式)122℃。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)分析化學、放射化學中用作萃取螯合劑,用于鋼〖鐵〗及有色金屬中微量稀土元素總量測定。萃取、分離鈾、钚、镅、镎和釷等金屬。測定硝酸、亞硝酸和碘。
〖保存〗:RT
1-苯基-3-吡唑烷酮
〖英文名稱〗:Phenidone;1-Phenyl-3-pyrazolidone;1-Phenyl-3-pyrazolidinone
〖其他名稱〗:菲尼酮;菲尼酮A;3-甲基-1-苯基-吡唑啉-5-酮;1,3,5-吡唑酮;3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮;1-苯基-3-吡唑啉酮;1-苯基-3-氧-1,2-二氮雜茂;1-苯基-3-吡唑酮;1-苯-3-吡唑啉酮
〖CAS號〗:92-43-3
C9H10N2O=162.19
〖級別〗:試劑級
純度:≥98.0%
〖熔點〗:119~122℃
氫氧溶解試驗:合格

基因列表    Stb12 菌種
cDNA 克隆系列    Stb13 菌種
細胞株系列    Stb14 菌種
重組蛋白(非病毒)系列    SURE 菌種
重組蛋白(病毒)系列    TB1 菌種
常用PCR引物    TH1 菌種
非凍型組織 RNA 保存液    Tuner(DE3) 菌種
非凍型組織 RNA 保存液    Turbo 菌種
動物 RNAout(TRIzol)     XL1-Blue 菌種
動物 RNAout(TRIzol)     XL-10 gold 菌種
血液 RNAout     Y1089 菌種
克必隆 eTS 超


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