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上海邦景實業有限公司
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一步式 RT-PCR Mix 1mL說明書運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。
一步式 RT-PCR Mix 1mL說明書?合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
一步式 RT-PCR Mix 1mL說明書?按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現 1.1Kb 的片段（如果使用隨機引物，將出現多個小片段）。
產品介紹：
?產品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶，內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提 供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
C18H14N2Na2O8S2=496.42
〖級別〗：AR
〖含量〗：≥85.0%
λmax：497～501nm(0.02 mol/L醋酸銨溶液)
干燥減量、〖氯化物〗及〖硫酸鹽〗總量：≤0.2 %
水中不溶物：≤0.2 %
〖砷〗：≤0.0001%
〖鉛〗：≤0.001%
〖重金屬〗(以Pb計)：≤0.002%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：橙色或紅色至紫紅色粉末。
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗
菌落 PCR 試劑盒 2.0 內毒素清除親和介質
微量核酸沉淀劑 Protein G 瓊脂糖
克必隆常態轉化液 DEAE 交換介質
細菌 RNAout CM 交換介質
細菌 RNAout Q 交換介質
克必隆 B 載體 SP 交換介質
RNase-free CTAB 溶液 ,20% 苯基介質
非酶 RNA 清除劑 1.0 丁基介質
RNA DEPC ( 焦碳酸二乙酯 ) 丁基硫介質
Taq DNA 聚合酶 天凈沙甲基化 PCR 2.0 試劑盒
Taq DNA 聚合酶 Phusion DNA 聚合酶
Pfu DNA 聚合酶 E.coli DNA 聚合酶 Ι
dNTP 溶液，2.5mM 磁珠動物 DNAout
細菌蛋白酶抑
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