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兩管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次說明書

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更新時間:2017-01-19 15:06:21瀏覽次數:399次

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產品簡介

兩管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次說明書運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細介紹

兩管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次說明書產品介紹:

兩管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次說明書產品及特點:

本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。

兩管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次說明書合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
兩管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次說明書按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。

〖英文名稱〗:Sulforhodamine B
〖其他名稱〗:磺酰羅丹明B細胞培養(yǎng)試劑染料;硫丹明B
〖CAS號〗:2609-88-3
C27H30N2O7S2=558.67
〖級別〗:Laser grade
〖含量〗:≥95.0%
〖熔點〗:≥300℃
UV absorption:λmax 558nm
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:綠色或褐色晶體或結晶粉末。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
依來鉻藍R
〖英文名稱〗:Eriochrome cyanine R;5-[α-(3-carboxy-5-methyl-4-oxo-2, 5-cyclohexadien-1-ylidene)-2-sulfobenzyl]-3-methylsalicylic acid,Eriochrome cyanine;Chromoxane cyanine R;Cyanine R;Chrome cyanine R;Solochrome cyanine R;C.I. 43820
〖其他名稱〗:藍光酸性鉻花青;羊毛鉻菁;媒介藍3;羊毛鉻花青R;3,3'-(3H-2,1-苯并惡噻-3-亞基)雙(6-羥基-5-甲基苯甲酸) S,S-二氧化物三鈉鹽;鉻花青R
〖CAS號〗:3564-18-9
C23H15Na3O9S=536.39
〖級別〗:Reagent grade

兩管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次說明書紅細胞裂解液 A 型 ( 核酸純化 )     α2巨球蛋白
超培養(yǎng)基    AEBSF 溶液,10mg/mL
RNase-free DTT 溶液 ,1M    膦酰二肽溶液,10mg/mL
RNA  b-Mercaptoethanol(2- 基乙醇 )    天凈沙單細胞 RNA 擴增試劑盒
通用洗柱液    堿性磷酸酶,偶聯
通用洗柱液    Origami(DE3) 感受態(tài)細胞
通用洗柱液    Origami B(DE3)plysS 感受態(tài)細胞 
一管式拭子 DNAout    Rosetta(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞
一管式拭子 DNAout    Rosetta-gami(DE3) 感受態(tài)細胞
DNA UV 防護劑    Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞
柱式植物 DNAout    Tuner(DE3) 感受態(tài)細胞
即用型藍白 T 載體 A 型 (T7-SP6,有 MCS)    Tuner(DE3)plysS 感受態(tài)細胞
DEPC 水    β-Actin 小鼠單抗
RNase-free PVP K30 溶液 ,20%    β-Actin 小鼠單抗
硅膠膜離心吸附柱再生液    α-Actin 小鼠單抗
液相內毒素清除劑    α-Actin 小鼠單抗
    小鼠抗 mCherry


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