兩管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次說明書產(chǎn)品介紹：
兩管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次說明書產(chǎn)品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提 供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標記等。
兩管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次說明書合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
兩管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次說明書按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機引物，將出現(xiàn)多個小片段）。
〖英文名稱〗：Sulforhodamine B
〖其他名稱〗：磺酰羅丹明B細胞培養(yǎng)試劑染料；硫丹明B
〖CAS號〗：2609-88-3
C27H30N2O7S2=558.67
〖級別〗：Laser grade
〖含量〗：≥95.0%
〖熔點〗：≥300℃
UV absorption：λmax 558nm
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：綠色或褐色晶體或結(jié)晶粉末。
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗
〖保存〗：RT
依來鉻藍R
〖英文名稱〗：Eriochrome cyanine R；5-[α-(3-carboxy-5-methyl-4-oxo-2, 5-cyclohexadien-1-ylidene)-2-sulfobenzyl]-3-methylsalicylic acid,Eriochrome cyanine；Chromoxane cyanine R；Cyanine R；Chrome cyanine R；Solochrome cyanine R；C.I. 43820
〖其他名稱〗：藍光酸性鉻花青；羊毛鉻菁；媒介藍3；羊毛鉻花青R；3,3'-(3H-2,1-苯并惡噻-3-亞基)雙(6-羥基-5-甲基苯甲酸) S,S-二氧化物三鈉鹽；鉻花青R
〖CAS號〗：3564-18-9
C23H15Na3O9S=536.39
〖級別〗：Reagent grade
兩管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次說明書紅細胞裂解液 A 型 ( 核酸純化 ) α2巨球蛋白
超培養(yǎng)基 AEBSF 溶液，10mg/mL
RNase-free DTT 溶液 ,1M 膦酰二肽溶液，10mg/mL
RNA b-Mercaptoethanol(2- 基乙醇 ) 天凈沙單細胞 RNA 擴增試劑盒
通用洗柱液 堿性磷酸酶，偶聯(lián)
通用洗柱液 Origami(DE3) 感受態(tài)細胞
通用洗柱液 Origami B(DE3)plysS 感受態(tài)細胞
一管式拭子 DNAout Rosetta(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞
一管式拭子 DNAout Rosetta-gami(DE3) 感受態(tài)細胞
DNA UV 防護劑 Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞
柱式植物 DNAout Tuner(DE3) 感受態(tài)細胞
即用型藍白 T 載體 A 型 (T7-SP6，有 MCS) Tuner(DE3)plysS 感受態(tài)細胞
DEPC 水 β-Actin 小鼠單抗
RNase-free PVP K30 溶液 ,20% β-Actin 小鼠單抗
硅膠膜離心吸附柱再生液 α-Actin 小鼠單抗
液相內(nèi)毒素清除劑 α-Actin 小鼠單抗
小鼠抗 mCherry
