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6nt 隨機引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL原理

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更新時間:2017-01-19 15:03:33瀏覽次數:558次

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產品簡介

6nt 隨機引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL原理運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細介紹

6nt 隨機引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL原理產品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
6nt 隨機引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL原理產品介紹:

6nt 隨機引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL原理合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
6nt 隨機引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL原理按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。

純度:≥99.0%
λmax:508~512nm
吸光度(E1%1cm):≥200(508~512nm,甲醇)
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:深紅棕色粉末。易溶于水,溶于乙醇、濃硫酸和堿類,其水溶液呈紅色,乙醇溶液呈桔黃色,濃硫酸溶液呈桔紅色,當稀釋后由桔黃色到紅色沉淀,當水溶液遇氫氧呈紅紫色。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)測定鋁和氟的試劑。銅和〖鋅〗等金屬中測定極少量的鋁。核染色
〖保存〗:RT
茜素藍S
〖英文名稱〗:Alizarin blue S;C.I.67415
〖CAS號〗:66675-89-6
C17H9NO4?2NaHSO3=499.37
〖級別〗:FMP
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:棕紫色結晶。溶于水,不溶于乙醇。

6nt 隨機引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL原理液相內毒素清除劑    β-Tubulin 小鼠單抗
固相內毒素清除劑    β-Tubulin 小鼠單抗
固相內毒素清除劑    α-Tubulin 小鼠單抗
T4 DNA 連接酶    α-Tubulin 小鼠單抗
T4 DNA 連接酶    GAPDH 小鼠單抗
土壤 DNAout    GAPDH 小鼠單抗
土壤 DNAout    植物 Actin 小鼠單抗
RNase-free SDS 溶液 ,10%    植物 Actin 小鼠單抗
RNase-free 乙酸鈉 ,3M,pH 5.2    組蛋白 3.1 小鼠單抗
RNase-free Tris HCl,1M,pH 6.5    組蛋白 3.1 小鼠單抗
一管式植物 DNAout    COX IV 兔單抗
一管式植物 DNAout    小鼠抗 His 標簽單抗
一管式 DNA 膠回收試劑盒    小鼠抗 His 標簽單抗
一管式 DNA 膠回收試劑盒    小鼠抗 Flag 標簽單抗
ris HCl,1M,pH 7.5


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