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6nt 隨機(jī)引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL原理

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

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更新時(shí)間:2017-01-19 15:03:33瀏覽次數(shù):560次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

6nt 隨機(jī)引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL原理運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細(xì)介紹

6nt 隨機(jī)引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL原理產(chǎn)品及特點(diǎn):
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長(zhǎng) cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶,內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長(zhǎng)可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫(kù)構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
6nt 隨機(jī)引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL原理產(chǎn)品介紹:

6nt 隨機(jī)引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL原理合成建文庫(kù)用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)R坏?RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長(zhǎng)度成反比。 RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對(duì)富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
6nt 隨機(jī)引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL原理按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對(duì)照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標(biāo)記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測(cè)。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段(如果使用隨機(jī)引物,將出現(xiàn)多個(gè)小片段)。

純度:≥99.0%
λmax:508~512nm
吸光度(E1%1cm):≥200(508~512nm,甲醇)
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:深紅棕色粉末。易溶于水,溶于乙醇、濃硫酸和堿類,其水溶液呈紅色,乙醇溶液呈桔黃色,濃硫酸溶液呈桔紅色,當(dāng)稀釋后由桔黃色到紅色沉淀,當(dāng)水溶液遇氫氧呈紅紫色。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)測(cè)定鋁和氟的試劑。銅和〖鋅〗等金屬中測(cè)定極少量的鋁。核染色
〖保存〗:RT
茜素藍(lán)S
〖英文名稱〗:Alizarin blue S;C.I.67415
〖CAS號(hào)〗:66675-89-6
C17H9NO4?2NaHSO3=499.37
〖級(jí)別〗:FMP
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:棕紫色結(jié)晶。溶于水,不溶于乙醇。

6nt 隨機(jī)引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL原理液相內(nèi)毒素清除劑    β-Tubulin 小鼠單抗
固相內(nèi)毒素清除劑    β-Tubulin 小鼠單抗
固相內(nèi)毒素清除劑    α-Tubulin 小鼠單抗
T4 DNA 連接酶    α-Tubulin 小鼠單抗
T4 DNA 連接酶    GAPDH 小鼠單抗
土壤 DNAout    GAPDH 小鼠單抗
土壤 DNAout    植物 Actin 小鼠單抗
RNase-free SDS 溶液 ,10%    植物 Actin 小鼠單抗
RNase-free 乙酸鈉 ,3M,pH 5.2    組蛋白 3.1 小鼠單抗
RNase-free Tris HCl,1M,pH 6.5    組蛋白 3.1 小鼠單抗
一管式植物 DNAout    COX IV 兔單抗
一管式植物 DNAout    小鼠抗 His 標(biāo)簽單抗
一管式 DNA 膠回收試劑盒    小鼠抗 His 標(biāo)簽單抗
一管式 DNA 膠回收試劑盒    小鼠抗 Flag 標(biāo)簽單抗
ris HCl,1M,pH 7.5


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