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上海邦景實業有限公司
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cDNA *鏈合成試劑盒10 次實驗步驟運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。
cDNA *鏈合成試劑盒10 次實驗步驟產品介紹：
cDNA *鏈合成試劑盒10 次實驗步驟產品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶，內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提 供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現 1.1Kb 的片段（如果使用隨機引物，將出現多個小片段）。
〖灼燒殘渣〗(以〖硫酸鹽〗計)：≤0.4%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：橙黃色結晶性粉末。溶于冰乙酸和乙醇，遇堿呈紅棕色，遇酸呈淺黃色，不溶于水和乙迷。〖熔點〗183℃。有刺激性
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)姜黃試紙，pH 8～9。測定硼
〖保存〗：RT
固紫B
〖英文名稱〗：Fast Violet B Salt；Azoic Diazo No. 41；4-Benzoylamino-2-methoxy-5-methylbenzenediazonium chloride hemi(zinc chloride) salt；4-Amino-5-methoxy-2-methylbenzanilide diazotated zinc double salt
〖其他名稱〗：固紫B鹽；耐曬紫B鹽；固紫羅蘭B鹽；堅牢紫B鹽；重氮堅牢紫B
〖CAS號〗：14726-28-4
C15H14N3O2·0.5ZnCl4=371.89
〖級別〗：BR
〖含量〗Dye content：≥60.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：黃色至褐色結晶性粉末。溶于水：10mg/ml
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗
〖保存〗：-20℃
柱式凋亡 DNAout 鏈霉親和素，HRP 標記
微型離心管研磨杵 ( 無離心管 ) Bouin 固定液
微型離心管研磨杵 ( 有離心管 ) 阿爾瑪藍細胞增殖與細胞毒檢測試劑
TG1 化學感受態細胞 阿爾瑪藍細胞增殖與細胞毒檢測試劑
柱式拭子 DNAout *
非凍型拭子 DNA 保存液 A( 無拭子 ) 多點突變試劑盒
非凍型拭子 DNA 保存液 B( 有拭子 ) 冷啟動核酸酶
柱式動物線粒體 DNAout，PCR cDNA 文庫構建試劑盒
柱式真菌 RNAout 小 RNA 克隆試劑盒
柱式毛發 DNAout DNA 去磷酸化試劑盒
M13mp18DNA
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