ROX 參考染料 II100μL說明書

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更新時(shí)間：2017-01-19 14:45:39瀏覽次數(shù)：652次

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產(chǎn)品分類 品牌分類

  核酸擴(kuò)增產(chǎn)品

常用PCR引物

種屬鑒定PCR Mix

單細(xì)胞擴(kuò)增

其他擴(kuò)增試劑盒

LAMP擴(kuò)增

全基因組擴(kuò)增（WGA）

即用型RT-PCR

RT

即用型PCR

PCR成分及添加劑

全部產(chǎn)品列表

暫無信息

上海邦景實(shí)業(yè)有限公司

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商鋪產(chǎn)品：9962條

所在地區(qū)：上海上海市

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

ROX 參考染料 II100μL說明書運(yùn)輸及保存低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細(xì)介紹

ROX 參考染料 II100μL說明書產(chǎn)品及特點(diǎn):
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長(zhǎng) cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長(zhǎng)可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫(kù)構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
ROX 參考染料 II100μL說明書產(chǎn)品介紹：

ROX 參考染料 II100μL說明書合成建文庫(kù)用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長(zhǎng)度成反比。 RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對(duì)富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
ROX 參考染料 II100μL說明書按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對(duì)照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標(biāo)記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測(cè)。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機(jī)引物，將出現(xiàn)多個(gè)小片段）。

對(duì)二甲氨基亞芐基羅丹寧
〖英文名稱〗：4-Dimethylaminobenzal rhodanine；p-Dimethylaminobenzal rhodanine；5-［p-(Dimethylamino)benzylidene］rhodanine；5-［(4-(Dimethylamino)phenyl)methylene］-2-thioxo-4-thiazolidinone
〖其他名稱〗：玫瑰紅銀試劑；對(duì)二甲氨基苯甲羅丹寧；5-［4-（二甲基氨基）苯基］亞甲基-2-硫代-4-噻唑烷酮；對(duì)二甲氨基亞芐羅丹寧；試銀靈；對(duì)二甲氨基芐羅丹寧；5-(對(duì)二甲氨基亞芐基)羅丹寧；4-二甲氨基亞芐基羅丹寧；5-(4-二甲氨基亞芐基)羅丹寧
〖CAS號(hào)〗：536-17-4
C12H12N2OS2=264.37
〖級(jí)別〗：AR
丙同溶解試驗(yàn)：合格
對(duì)銀靈敏度試驗(yàn)：合格
〖灼燒殘?jiān)?以〖硫酸鹽〗計(jì))：≤0.2%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：深紅色針狀結(jié)晶。溶于強(qiáng)酸呈黃色，溶于丙同，微溶于沸乙醇，極微溶于氯方、乙迷和苯，幾乎不溶于水。約260℃熔結(jié)，約280℃熔融。zui大吸收波長(zhǎng)451nm。
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)有機(jī)靈敏試劑，光度測(cè)定銀、金、汞、鉑、鈀
〖保存〗：RT
丹磺酰氯
〖英文名稱〗：DNSCl ；1-Dimethylaminonaphthalene-5-sulfonylchloride；Dansyl chloride；5-Dimethylami-naphthalene sulfonyl chloride

ROX 參考染料 II100μL說明書*0 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞   天凈沙細(xì)胞蛋白質(zhì) -RNA 雙提取試劑盒
動(dòng)物細(xì)胞裂解液 A   絲狀真菌線粒體 DNAout
動(dòng)物細(xì)胞裂解液 B   天凈沙通用型MLPA 試劑盒
蛋白酶抑制劑混合液   LAMP 可見光染料
蛋白磷酸酶抑制劑混合液 1   RNase 抑制劑 ( 豬源 )
一站式 SDS-PAGE 電泳套裝   低熔點(diǎn)瓊脂糖
口腔拭子 ( 科研簡(jiǎn)裝 )    低熔點(diǎn)瓊脂糖
考馬斯亮藍(lán) G-250 染液   Red-Tth DNA 聚合酶
Western 印跡膜抗體清除劑   Red-Pfu DNA 聚合酶
Western 印跡膜抗體清除劑   Red-KOD DNA 聚合酶
Bradford 法蛋白定量試劑盒   MgSO4溶液，10mM，PCR
Bradford 法蛋白定量試劑盒   石蠟油，PCR
BCA 法蛋白定量試劑盒   葡萄球菌 RNAout
超敏型 BCA 法蛋白定量試劑盒   分枝桿菌 RNAout
不含甲酰胺）

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