ROX 參考染料200μL原理

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產(chǎn)品分類 品牌分類

  核酸擴(kuò)增產(chǎn)品

常用PCR引物

種屬鑒定PCR Mix

單細(xì)胞擴(kuò)增

其他擴(kuò)增試劑盒

LAMP擴(kuò)增

全基因組擴(kuò)增（WGA）

即用型RT-PCR

RT

即用型PCR

PCR成分及添加劑

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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司

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產(chǎn)品簡介

ROX 參考染料200μL原理運(yùn)輸及保存低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細(xì)介紹

ROX 參考染料200μL原理合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
ROX 參考染料200μL原理按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標(biāo)記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機(jī)引物，將出現(xiàn)多個(gè)小片段）。

ROX 參考染料200μL原理產(chǎn)品介紹：

ROX 參考染料200μL原理產(chǎn)品及特點(diǎn):

本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。

〖其他名稱〗：5-二甲氨基-1-萘磺酰氯；丹酰氯；1-二甲氨基萘-5-磺酰氯；5-二甲氨基萘-1-磺酰氯；氯化-1-二甲氨基萘-5-磺酰；5-二甲基氨基-1-萘磺酰氯
〖CAS號(hào)〗：605-65-2
C12H12ClNO2S=269.75
〖級別〗：BR
〖含量〗： ≥98.0%
〖熔點(diǎn)〗：72～74℃
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：黃色或橙色結(jié)晶。對濕敏感。溶于丙同、吡啶、苯和二氧六環(huán)，不溶于水，極緩慢地被水分解。可在氯化鈣干燥器中穩(wěn)定數(shù)月。
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)酚類和蛋白質(zhì)、氨基酸的熒光標(biāo)記。色譜試劑
〖保存〗：-20℃，避光
核固紅
〖英文名稱〗：Nuclear fast red；Calcin red；Kernechtrot；1-Amino-2,4-dihydroxyanthraquinone-3-sulfonic acid sodium salt ；C.I. 60760
〖其他名稱〗：細(xì)胞核堅(jiān)牢紅；鈣紅；核快紅；乙二縮雙鄰氮基酚
〖CAS號(hào)〗：6409-77-4
C14H8NNaO7S=357.27

ROX 參考染料200μL原理mRNA 提取試劑盒   柱式葡萄球菌 RNAout
大提柱式動(dòng)物 RNAout   柱式分枝桿菌 RNAout
大提柱式血液 RNAout   白色念珠菌 RNAout
大提柱式植物 RNAout   柱式白色念珠菌 RNAout
大提柱式真菌 RNAout   LB 平板培養(yǎng)基無抗
大提柱式細(xì)菌 RNAout   LB 平板培養(yǎng)基 (Amp 抗性 )
一站式大提柱式 miRNAout   LB 平板培養(yǎng)基 (Kan 抗性 )
一站式動(dòng)物 mRNAout   LB 平板培養(yǎng)基 (Tet 抗性 )
IPTG 溶液，200mg/mL   Protein A 磁珠
X-Gal 溶液，20mg/mL   Protein G 磁珠
蛋白酶 K 溶液，10mg/mL   T4 RNA 連接酶 2( 雙鏈 RNA 連接酶 )
大提柱式質(zhì)粒 DNAout    T4 RNA 連接酶 2( 截短型 )
大提柱式質(zhì)粒 DNAout    T4 RNA 連接酶 2( 截短型 K227Q)
超雜交液 A（

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