即用型熒光定量 PCR 試劑盒600 次實驗步驟

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更新時間：2017-01-19 14:42:29瀏覽次數(shù)：623次

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產(chǎn)品分類 品牌分類

  核酸擴(kuò)增產(chǎn)品

常用PCR引物

種屬鑒定PCR Mix

單細(xì)胞擴(kuò)增

其他擴(kuò)增試劑盒

LAMP擴(kuò)增

全基因組擴(kuò)增（WGA）

即用型RT-PCR

RT

即用型PCR

PCR成分及添加劑

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上海邦景實業(yè)有限公司

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產(chǎn)品簡介

即用型熒光定量 PCR 試劑盒600 次實驗步驟運輸及保存低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細(xì)介紹

即用型熒光定量 PCR 試劑盒600 次實驗步驟產(chǎn)品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
即用型熒光定量 PCR 試劑盒600 次實驗步驟產(chǎn)品介紹：

合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標(biāo)記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機(jī)引物，將出現(xiàn)多個小片段）。

鈣指示劑
〖英文名稱〗：Calconcarboxylic acid；3-Hydroxy-4-(2-hydroxy-4-sulfo-1-naphthylazo)naphthalene-2-carboxylic acid
〖其他名稱〗：鈣羧酸指示劑；鈣紅；鈣羧酸鈉；鈣羧酸；鈣試劑羧酸鈉；3-羥基-4-[(2-羥基-4-磺基-1-萘基)偶氮]-2-萘羧酸；2-羥基-1-(2-羥基-4-磺基-1-萘基偶氮)-3-萘甲酸；鈣試劑羧酸；3-羥基-4-(2-羥基-4-磺基-1-萘基偶氮)萘-2-羧酸；1-(2-羥基-4-磺基-1-萘基偶氮)-2-羥基-3-萘甲酸
〖CAS號〗：3737-95-9
C21H14N2O7S=438.41
〖級別〗：IND
稀氫氧溶液溶解試驗：合格
絡(luò)合試驗：合格
滴定試驗：合格
〖灼燒殘渣〗(以〖硫酸鹽〗計)：≤0.3%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：棕色至色結(jié)晶或褐色粉末。易溶于堿液和氨水，微溶于水。在pH不大于10時呈紅色，pH13～14間為淺藍(lán)色，能和鈣形成紅色螯合物。〖熔點〗300℃。zui大吸收波長 560(366)nm。有刺激性。商品也有制成鈉鹽的，易溶于水，水溶液和乙醇溶液均不穩(wěn)定。常與100倍的氯混勻后使用

大提柱式動物 DNAout   一站式 MBP 標(biāo)簽蛋白純化套裝
大提柱式血液 DNAout   SUMO 蛋白酶
大提柱式植物 DNAout   TEV 蛋白酶
大提柱式真菌 DNAout   人玻連蛋白
大提柱式細(xì)菌 DNAout   葡激酶
大提柱式細(xì)菌 DNAout( 含* )   PreScissiom 蛋白酶
大提柱式土壤 DNAout   可逆性銅染試劑盒
液體樣品 RNAout   可逆性鋅染試劑盒
液體樣品 RNAout   糖蛋白 PAGE 染液
微量樣品*   脂蛋白 PAGE 染液
微量樣品*   一站式乙酸 - 尿素 PAGE 電泳套裝
一步法96 孔板單菌落質(zhì)粒DNAout( 離心法)   免疫蛋白清除劑
一步法96 孔板單菌落質(zhì)粒DNAout( 離心法)   磷酸化蛋白純化試劑盒
RNase-free Tris HCl,1M,pH 9.0   糖蛋白蛋白純化試劑盒
套裝

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