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即用型熒光定量 PCR 試劑盒100 次說明書

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更新時間:2017-01-19 14:41:06瀏覽次數:428次

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產品簡介

即用型熒光定量 PCR 試劑盒100 次說明書運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細介紹

即用型熒光定量 PCR 試劑盒100 次說明書合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
即用型熒光定量 PCR 試劑盒100 次說明書按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。

產品介紹:

產品及特點:

本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。

〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)絡合指示劑,測定鈣
〖保存〗:RT
鉻天青S
〖英文名稱〗:Chromeazurol S;Mordant Blue 29;C.I. 43825;Trisodium 5-[(3-carboxylato-5-methyl-4-oxo-2,5-cyclohexadien-1-ylidene)(2,6-dichloro-3-sulphonatophenyl)methyl]-2-hydroxy-3-methylbenzoate
〖其他名稱〗:媒染藍29;5-[(3-羧基-5-甲基-4-氧代-2,5-環己二烯-1-亞基)(2,6-二氯-3-磺基苯基)甲基]-2-羥基-3-甲基苯甲酸三鈉鹽;媒染蘭29;酸性媒介藍;3〞-磺基-2〞,6〞-二氯-3,3ˊ-二甲基-4-羥基品紅酮-5,5ˊ-二羧酸三鈉鹽
〖CAS號〗:1667-99-8
C23H13Cl2Na3O9S=605.28
〖級別〗:AR
紅外光譜鑒定:合格
紫外光譜:合格
λmax:425~435nm(in water)
金屬滴定靈敏性試驗:合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:棕色粉末;易溶于水,為棕黃色溶液、溶于醇,溶液呈紅棕色
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)指示劑,用以螯合滴定鋁、鈣、〖鐵〗、〖鎳〗和釷。分光光度測定鋁、鈹、鈰、鈷、鉻、銅、〖鐵〗、鎵、鉿、銦、鑭、錳、鉬、〖鎳〗、鈀、銠、鈧、釷、鈦、釩、釔、〖鋅〗、鋯等金屬離子和氟化物
〖保存〗:RT,保質期5年
汽巴蘭3GA
〖英文名稱〗:Cibacron Blue 3G-A;1-Amino-4-[[4-[[4-Chloro-6-[(2-Sulfophenyl)Amino]-1,3,5-Triazin-2-Yl]Amino]-3-Sulfo-Phenyl]Amino]-9,10-Dioxo-Anthracene-2-Sulfonic Acid
〖其他名稱〗:汽巴藍3GA;1-氨基-4-[[4-[[4-氯-6-[(2-磺基苯基)氨基]-s-三嗪-2-基]氨基]-3-磺基-苯基]氨基]-9,10-二氧代-蒽-2-磺酸
〖CAS號〗:84166-13-2

TE 緩沖液,PH7.0    脂蛋白純化試劑盒
TE 緩沖液,PH7.5    植物線粒體總蛋白提取試劑盒
TE 緩沖液,PH8.0    植物葉綠體蛋白提取試劑盒
TE 緩沖液,PH8.5    石蠟包埋組織蛋白提取試劑盒
剝離硅烷    昆蟲細胞裂解液
DH5α 化學感受態細胞    細胞核蛋白提取試劑盒
雙染細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-FITC·PI)    動物線粒體總蛋白提取劑盒
雙染細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-FITC·PI)    高效農桿菌感受態細胞制備試劑盒
一站式*檢測 TUNEL 試劑盒 (DAB 法 )    YPD 液體培養基
TRIzol 伴侶    YPG 液體培養基
一站式植物 mRNAout    YPDG 液體培養基
非變性法蛋白沉淀試劑盒    MAL 指示劑培養基
柱式昆蟲 DNAout    GAL 指示劑培養基
石蠟包埋組織 RNAout    酵母及產孢培養基
一站式真菌 mRNAout    酵母產孢培養基
超快核酸銀染試劑盒    超雜交液 (Oligo 探針 )
e-SDS-PAGE 


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