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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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更新時(shí)間：2017-01-19 14:32:57瀏覽次數(shù)：289次
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即用型熱啟動 PCR 試劑盒1.5mL原理運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。
即用型熱啟動 PCR 試劑盒1.5mL原理產(chǎn)品及特點(diǎn):
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提 供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
即用型熱啟動 PCR 試劑盒1.5mL原理產(chǎn)品介紹：
合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標(biāo)記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機(jī)引物，將出現(xiàn)多個(gè)小片段）。
C27H31N2O7S2 · 0.5Ca=579.71
〖級別〗：AR
〖含量〗：≥85.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：暗紅青蓮色或深藍(lán)紫色粉末或顆粒。易溶于水呈藍(lán)色，微溶于乙醇呈藍(lán)綠色。遇濃硫酸顯棕橄欖黃色，稀釋顯深黃至綠色。水溶液加氫氧不變色，加熱則呈深紫色
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)酸堿指示劑，pH 0.8(黃)～3.0(藍(lán))。氧化還原指示劑(黃綠色～橙色)。螺旋體和活體染色
〖保存〗：RT
硫酸奎寧二水物
〖英文名稱〗：Quinine hemisulfate salt dihydrate
〖其他名稱〗：(8S,9R)-6'-甲氧基金雞納-9-醇〖硫酸鹽〗二水物；奎寧〖硫酸鹽〗二水物；奎寧硫酸酯二水物；硫酸金雞納鹽二水物
〖CAS號〗：6119-70-6
C40H48N4O4·H2O4S·2H2O=782.96
〖級別〗：BR
〖含量〗：≥98%
〖干燥失重〗：≤5.0%
PH：5DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)φX174 DNA/Hinc Ⅱ 無內(nèi)毒素螢火蟲熒光素
隨機(jī)引物法 DNA 探針標(biāo)記試劑盒 Sephacryl S-400 基質(zhì)
隨機(jī)引物法 DNA 探針*標(biāo)記試劑盒 鏈霉親和素
隨機(jī)引物法 DNA 探針標(biāo)記試劑盒 鏈霉親和素，AP 標(biāo)記
PCR 法 DNA 探針標(biāo)記試劑盒 DNA Triton
PCR 法 DNA 探針*標(biāo)記試劑盒 DNA Tween 20
PCR 法 DNA 探針標(biāo)記試劑盒 *，測序
TdT 加尾法 DNA 標(biāo)記試劑盒 彈性蛋白酶
TdT 加尾法 DNA *標(biāo)記試劑盒 *
TdT 加尾法 DNA 標(biāo)記試劑盒 嗜熱菌蛋白酶
柱式 BAC DNAout *，質(zhì)譜
DTT，蛋白
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