即用型 PCR 試劑盒 3.01 mL實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品介紹：
即用型 PCR 試劑盒 3.01 mL實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長(zhǎng) cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長(zhǎng)可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提 供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫(kù)構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
合成建文庫(kù)用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長(zhǎng)度成反比。 RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對(duì)富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對(duì)照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標(biāo)記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測(cè)。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機(jī)引物，將出現(xiàn)多個(gè)小片段）。
〖灼燒殘?jiān)? ≤25.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：橙紅色粉末。能與多種金屬離子絡(luò)合,其溶液為紅紫色。溶于水,不溶于無(wú)水乙醇
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)滴定〖鐵〗、鋁、〖鉛〗和釷的絡(luò)合指示劑。光度測(cè)定鉍、鋯、鉿和釷
〖保存〗：RT。保質(zhì)期5年
2-萘磺酸鈉
〖英文名稱〗：Sodium 2-naphthalenesulfonate；2-Naphthalenesulfonic acid sodium salt；Naphthalene-2-sulfonic acid sodium salt
〖其他名稱〗：β-萘磺酸鈉；萘-2-硫酸鈉
〖CAS號(hào)〗：532-02-5
C10H7NaO3S=230.22
〖級(jí)別〗：BR
〖含量〗：≥99.0 %
〖氯化物〗：≤0.01%
〖重金屬〗：≤15ppm
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：白色結(jié)晶或粉末。有吸濕性。溶于水，不溶于乙醇。對(duì)眼睛、呼吸系統(tǒng)、皮膚有刺激性。
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)胺類和氨基酸衍生物的離子對(duì)色譜。動(dòng)物膠的液化劑
〖保存〗：RT。保質(zhì)期5年
達(dá)旦黃
〖英文名稱〗：Titan yellow；Chlorazol yellow2G；Diazamine golden yellow T；Clayton yellow；Thiazol(e) yellow；Thiazol yellow G；2,2′-[( Diazoamino)-di-p-phenylene]-bis-(6-methyl-7-benzothiazole sulfonic acid disodium salt；Direct yellow 9；C.I. 19540
〖其他名稱〗：2,2’-(1-三嗪-1,3-二基二-4,1-亞苯基)雙(6-甲基-7-苯并噻唑磺酸)二鈉鹽；噻唑黃；鈦黃；〖鎳〗鈦黃；蒂坦黃
〖CAS號(hào)〗：1829-00-1
即用型高保真 PCR 試劑盒 CHAPS
RNA Sarkosyl( 月桂酰 -N- 甲基氨基乙酸鈉 ) 辛甲基 β 葡糖苷
RNA SDS( 十二烷基硫酸鈉 ) 辛甲基硫吡喃葡萄糖苷 (OTG)
一站式 TA 克隆試劑盒 n- 十二烷基 -β-D- 麥芽糖苷
一站式 TA 克隆試劑盒 ( 含感受態(tài) ) 脫氧膽酸鈉
大提柱式 DNA 清除劑 膽酸鈉
即用型 PCR 試劑盒 3.0 十二烷基磺酸鈉
即用型 PCR 試劑盒 3.0 去垢劑去除樹(shù)脂
菌體內(nèi)毒素清除劑 十二烷基磺酸鈉清除劑
細(xì)菌總蛋白質(zhì)微量提取試劑盒 β- 基乙醇，蛋白
無(wú) RNase 的
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