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探針標記 PCR Mix 0.5mL說明書

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更新時間:2017-01-19 14:25:34瀏覽次數:414次

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產品簡介

探針標記 PCR Mix 0.5mL說明書運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細介紹

探針標記 PCR Mix 0.5mL說明書合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
探針標記 PCR Mix 0.5mL說明書按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。

產品介紹:

產品及特點:

本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。

C28H19N5Na2O6S4=695.72
〖級別〗:IND
〖含量〗:≥65%
pH變色域:11.0(黃色)~13.0(紅色)
溶解度試驗:合格
干燥失量:≤10.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:淺黃棕色粉末。對光敏感。溶于水、乙醇(呈黃色溶液)、氫氧溶液(呈紅黃色)、硫酸(呈棕黃色)。zui大吸收波長 402nm
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)光度測定鎂。檢定硼和鎂。酸堿指示劑,pH11.0(黃)~13.0(紅)。生物染色劑。顯微鏡檢查法用熒光指示劑。吸附指示劑
〖保存〗:RT,避光。保質期5年
N-乙基-N-(2-羥基-3-磺丙基)-3-甲基本胺鈉鹽
〖英文名稱〗:TOOS sodium salt;Sodium 3-(N-ethyl-3-methylanilino)-2-hydroxypropanesulfonate;3-(N-Ethyl-3-methylanilino)-2-hydroxypropanesulfonic acid sodium salt
〖其他名稱〗:N-乙基-N-(2-羥基-3-磺丙基)間甲苯胺鈉鹽
〖CAS號〗:82692-93-1
C12H18NNaO4S=295.33
〖級別〗:試劑級
〖含量〗:≥98%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:白色結晶粉末。溶于水
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)用于酶光度法測定過氧化輕。
〖保存〗:RT,避光。保質期5年

膜結合 DNA 清除試劑盒    DTT,免稱量蛋白
冰袋    TCEP 鹽酸膦
一管式 TMB 顯色液 A( 可溶型 )     TCEP 溶液,0.5M
一管式 TMB 顯色液 B ( 沉淀型 )     鈷柱介質
柱式骨骼 DNAout    咪唑
非凍型拭子病毒保存液    亞氨二乙酸介質
Denhardt 溶液,50×    GST 固定試劑盒
Denhardt 溶液,50×    * S 轉移酶
Hanks 溶液    細胞表面蛋白分離試劑盒
T7 體外轉錄試劑盒    磷酸化蛋白富集試劑盒
T7 體外轉錄試劑盒    ConA 糖蛋白分離試劑盒
SP6 體外轉錄試劑盒    還原劑兼容型 BCA 蛋白定量試劑盒
SP6 體外轉錄試劑盒    牛血清白蛋白標準品,2mg/mL
o-SPIA cDNA 擴增試劑盒


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