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上海邦景實業(yè)有限公司
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更新時間:2017-01-19 14:21:40瀏覽次數(shù):470次
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DNA 修復混合液 150 次實驗步驟運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。
DNA 修復混合液 150 次實驗步驟產(chǎn)品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶,內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標記等。
DNA 修復混合液 150 次實驗步驟產(chǎn)品介紹:合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)R坏?RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現(xiàn)多個小片段)。
〖級別〗:AR
靈敏度實驗:合格
zui大吸收波長:555~565nm
〖灼燒殘渣〗(以〖硫酸鹽〗計):≤0.2%
氫氧溶液溶解試驗:合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:紅棕色粉末。溶于稀堿溶液呈紅紫色,微溶于沸乙醇、丙同、乙酸和甲苯,均呈黃色,幾乎不溶于水。〖熔點〗199~200℃。有刺激性
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)鎂和鉬的測定。吸附指示劑
〖保存〗:RT,避光
4-[(2,4-二羥基苯基)偶氮]苯磺酸鈉
〖英文名稱〗:Tropaeolin O sodium salt;4-([2,4-Dihydroxyphenyl]azo)benzenesulfonic acid sodium salt;Acid Orange 6;Chrysoin;Resorcinol yellow
〖其他名稱〗:*磺;金蓮橙O;酸性橙6;金蓮橙;*品黃;偶氮*磺酸鈉;樹脂酚黃O
〖CAS號〗:547-57-9
C12H9N2O5SNa=316.27
〖級別〗:IND
〖含量〗:≥65.0%
紅外光譜〖鑒別〗:合格
PH變色域:11.1(黃)~12.7(橙)
水溶解試驗:合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:紅褐色至棕色粉末。溶于水呈金黃色,溶于乙醇、丙同和溶纖劑,不溶于其他有機溶劑。水溶液加濃鹽酸無變化,加入濃氫氧呈橙棕色。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)生物染色
〖保存〗:RT
耐爾藍A
〖英文名稱〗:Nile Blue A;Basic Blue 12;Nile blue sulfate
〖其他名稱〗:5-氨基-9-(二乙基氨基)苯并[α]吩惡嗪-7-翁〖硫酸鹽〗;硫酸耐爾藍;硫酸尼羅藍;耐爾藍;耐爾蘭A;尼羅藍A;耐爾蘭;尼羅蘭A
〖CAS號〗:3625-57-8
牛磺酸 *化的 β- 半乳糖苷酶
甜菜堿 *化蛋白 G
遺傳霉素 *化蛋白 A
重蒸酚 *化蛋白 L
琥珀酸 ( 丁二酸 ) *化兔 IgG
馬來酸 *化山羊抗親和素
四甲基乙二胺 Western 封堵液
四甲基乙二胺 酪蛋白溶液 (TBS)
甲叉雙丙烯酰胺 酪蛋白溶液 (PBS)
刀豆球蛋白 A Ⅲ ONPG 干粉
刀豆蛋白 A IV Tris 緩沖鹽溶液 (TBS)
* 氯萘酚溶液,3mg/mL
腐胺 CN/DAB 底物套裝
牛胰島素 ABTS 溶液,7mM
羧肽酶 A( 牛胰 )
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