DNA 修復(fù)混合液 30 次說(shuō)明書

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  核酸擴(kuò)增產(chǎn)品

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單細(xì)胞擴(kuò)增

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LAMP擴(kuò)增

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RT

即用型PCR

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

DNA 修復(fù)混合液 30 次說(shuō)明書運(yùn)輸及保存低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細(xì)介紹

DNA 修復(fù)混合液 30 次說(shuō)明書合成建文庫(kù)用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長(zhǎng)度成反比。 RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對(duì)富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
DNA 修復(fù)混合液 30 次說(shuō)明書按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對(duì)照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標(biāo)記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測(cè)。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機(jī)引物，將出現(xiàn)多個(gè)小片段）。

產(chǎn)品介紹：
產(chǎn)品及特點(diǎn):

本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長(zhǎng) cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長(zhǎng)可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫(kù)構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。

2C20H20N3O·SO4=732.85
〖級(jí)別〗：AR
〖含量〗：≥75%
〖熔點(diǎn)〗：≥300℃
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：暗褐色或綠色粉末。溶于水
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗
〖保存〗：RT
尼羅紅
〖英文名稱〗：Nile Red；9-(Diethylamino)benzo[a]phenoxazin-5(5H)-one；Nile Blue A Oxazone
〖其他名稱〗：尼羅絲
〖CAS號(hào)〗：7385-67-3
C20H18N2O2=318.37
〖級(jí)別〗：BR
純度：≥95%
Maximum UV absorption(Fluorescence)：530～635nm
Maximum UV absorption(UV)：553nm
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：綠色或棕色粉末。溶于甲醇：1mg/ml。〖熔點(diǎn)〗203～205℃
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。

葡聚糖凝膠 G-15   pNPP 干粉
衣霉素   DNA 包被溶液
apo- 轉(zhuǎn)鐵蛋白   乙烯乙二醇
apo- 轉(zhuǎn)鐵蛋白   HRP 穩(wěn)定劑 / 稀釋劑
L- 轉(zhuǎn)鐵蛋白   鹽酸胍溶液，8M
戊二醛，25% 水溶液   蛋白折疊試劑盒
L- *鹽酸鹽   考馬斯亮藍(lán) R-250
變色硅膠   考馬斯亮藍(lán) G-250
丙酮酸鈉   多核苷酸磷酸化酶
3-( 環(huán)己胺 )-1- 丙磺酸   辣根過氧化物酶，偶聯(lián)
* G 鉀鹽   一站式平末端克隆試劑盒
*   脈沖電泳 Marker( 酵母染色體 PFG)
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚葡萄糖苷   脈沖電泳 Marker(Lambda LadderPFG)
溴酚藍(lán)   脈沖電泳 Marker( 低范圍 PFG)
溴甲酚紫   動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 1
鳥苷   動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 2
三 ( 羥甲基 ) 氨基甲烷鹽酸鹽   動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 3
吲哚   動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 4
6- 芐基氨基嘌呤   動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 5
對(duì)氨基苯磺酸   動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 6
溴化乙錠 (EB)   昆蟲種屬鑒定 PCR Mix
亞精胺 ( 精脒 )   無(wú)脊椎動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix
堿性磷酸酶標(biāo)記

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