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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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PCR Mix 染料10mL說明書運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。
PCR Mix 染料10mL說明書合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)R坏?RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
PCR Mix 染料10mL說明書按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標(biāo)記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段(如果使用隨機(jī)引物,將出現(xiàn)多個(gè)小片段)。
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶,內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
〖保存〗:-20℃
固紅B二磺酸萘鹽
〖英文名稱〗:Fast red B salt 1,5-Naphthalenedisulfonate;Bis(2-methoxy-4-nitrophenyldiazonium) 1,5-Naphthalenedisulfonate
〖其他名稱〗:2-甲氧基-4-硝基-苯重氮1,5-萘二磺酸鹽;耐曬紅B,1,5-萘二磺酸鹽
〖CAS號〗:61925-55-1
C24H18N6O12S2=646.56
〖級別〗:BR
純度:≥97%(HPLC)
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:粉末。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT,避光
羥基萘酚藍(lán)
〖英文名稱〗:Hydroxynaphthol blue;1-(2-Hydroxy-4-sulfo-1-naphthylazo)-2-naphthol-3,6-disulfonic acid trisodium salt;3-Hydroxy-4-(2-hydroxy-4-sulfo-1-naphthylazo)naphthalene-2,7-disulfonic acid trisodium salt
〖其他名稱〗:色酚蘭
〖CAS號〗:63451-35-4
C20H11N2Na3O11S3=620.47
〖級別〗:金屬滴定指示劑
〖含量〗:≥70%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:深紫色或深藍(lán)色粉末。HNB是鈣的金屬指示劑,堿土金屬離子、稀土金屬離子、鈾離子的比色試劑。HNB易溶于水和乙醇,HNB的水溶液在pH 7-12時(shí)呈藍(lán)色,pH >13時(shí)呈紅色,在pH 10且有鈣離子存在時(shí)呈粉紅色。堿土金屬離子和稀土金屬離子的檢測范圍分別為1-600 ppm和1-300 ppm。復(fù)合物的zui大波長是650 nm。HNB也被用于UO2(II)的檢測。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)金屬滴定指示劑,用于堿土金屬離子, 稀土金屬離子的檢測
〖保存〗:RT
羥基萘酚藍(lán)二鈉
〖英文名稱〗:Hydroxy naphthol blue disodium salt
β-D- 阿糖胞苷 驢抗山羊 IgG,堿性磷酸酶標(biāo)記
8- 羥基喹啉 山羊抗兔 IgG(H+L),辣根過氧化物酶標(biāo)記
細(xì)胞松弛素 B 山羊抗兔 IgG(H+L),辣根過氧化物酶標(biāo)記
氯化銨 T 山羊抗小鼠 IgG(H+L),辣根過氧化物酶標(biāo)記
N ,N- 雙 (2- 羥乙基 ) * 山羊抗小鼠 IgG(H+L),辣根過氧化物酶標(biāo)記
D- 葡萄糖 -1- 磷酸二鈉 山羊抗人 IgG(H+L),辣根過氧化物酶標(biāo)記
伊紅 Y, 醇溶性 兔抗雞 IgY,辣根過氧化物酶標(biāo)記
十二烷基硫酸鈉 驢抗山羊 IgG,辣根過氧化物酶標(biāo)記
乙酸- 2 -萘脂 山羊抗小鼠 IgG,熒光素 488 標(biāo)記
硫酸鐵 山羊抗小鼠 IgG,熒光素 555 標(biāo)記
丁酸鈉 山羊抗兔 IgG,異硫氰酸熒光素標(biāo)記
氯化血紅素 山羊抗兔 IgG,藻紅蛋白標(biāo)記
N-2- 羥乙基 -N’-3- 丙磺酸 山羊抗兔 IgG,熒光素 488 標(biāo)記
焦碳酸二乙酯 山羊抗兔 IgG,熒光素 555 標(biāo)記
二磷酸腺苷二鈉 山羊抗小鼠 IgG,異硫氰酸熒光素標(biāo)記
反玉米素 山羊抗小鼠 IgG,藻紅蛋白標(biāo)記
赤蘚紅 B 二鈉鹽 WarmStart Bst DNA 聚合酶
50mg/mL
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