dNTP 和引物清除劑100 次說明書

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更新時間：2017-01-19 14:16:13瀏覽次數(shù)：474次

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產(chǎn)品分類 品牌分類

  核酸擴(kuò)增產(chǎn)品

常用PCR引物

種屬鑒定PCR Mix

單細(xì)胞擴(kuò)增

其他擴(kuò)增試劑盒

LAMP擴(kuò)增

全基因組擴(kuò)增（WGA）

即用型RT-PCR

RT

即用型PCR

PCR成分及添加劑

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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司

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產(chǎn)品簡介

dNTP 和引物清除劑100 次說明書運(yùn)輸及保存低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細(xì)介紹

dNTP 和引物清除劑100 次說明書產(chǎn)品介紹：
dNTP 和引物清除劑100 次說明書產(chǎn)品及特點(diǎn):

本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。

合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標(biāo)記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機(jī)引物，將出現(xiàn)多個小片段）。

〖其他名稱〗：羥基萘酚蘭二鈉鹽；色酚蘭二鈉鹽
〖CAS號〗：165660-27-5
C20H12N2O11S3Na2=598.49
〖級別〗：試劑級
水分：≤1.0%
〖重金屬〗：≤10ppm
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：深藍(lán)色至藍(lán)紫色結(jié)晶或粉末。UV absorption：λmax 650 nm
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)金屬滴定指示劑,用于測定鈣
〖保存〗：RT
堿性木素
〖英文名稱〗：Lignin alkali；Lignin kraft
〖其他名稱〗：利格寧；木質(zhì)素；硫酸木素；牛皮木素；石成木素；對氮蒽藍(lán)；引杜林；醋酯藍(lán)；木質(zhì)素磺酸鹽減水劑
〖CAS號〗：8068-05-1
分子量：1000～5000
〖級別〗：BR
PH (1%水溶液)：11～12
還原物〖含量〗：≤4%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：棕色粉末，草漿提取，溶于水。

乙烯利   4× 核酸液相雜交液
芐瞇鹽酸鹽   DNA 溶解液
快流速 DEAE- 瓊脂糖凝膠   免 RNA 提取 FFPE RT-PCR 試劑盒
伊紅 Y 二鈉鹽，水溶性   ECL 法*雜交檢測試劑盒
γ- 環(huán)狀糊精   DNA Shuffling 試劑盒
D- 棉子糖   核酸稀釋液，測 OD
D- 氨基半乳糖鹽酸鹽   工具酶緩沖液
1,4- 雙 (5- 苯基 -2- 噁唑基 ) 苯   EDTA 溶液，0.2M
1,4- 雙 (5- 苯基 -2- 噁唑基 ) 苯   Sulfolobus DNA 聚合酶 IV
鏈脲佐菌素   鏈激酶
*   ONPG 溶液，10mg/mL
橙黃G鈉   探針標(biāo)記 PCR Mix
鄰聯(lián)茴香胺   DNA Acryl 助沉劑
3- 苯甲酰丙酸   彩色 Acryl 助沉劑
*鹽酸鹽   分子生物學(xué)糖原干粉
牛磺酸脫氧膽酸鈉   分子生物學(xué)糖原溶液，10mg/mL
β- 氨基丙 96 孔板病毒 RNAout( 真空法 )
P- 硝基苯基磷酸*   超敏化學(xué)發(fā)光 (AP) 檢測試劑盒（ECL）
硝苯吡啶   磁珠法 mRNA 提取試劑盒
尿苷 -5'- 二磷酸   96 孔板血液 DNAout( 離心法 )
鹽酸*   Deep Vent DNA 聚合酶
   *溶液 ,

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