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dGTP 溶液,100mM0.5mL說明書

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

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更新時(shí)間:2017-01-19 14:11:08瀏覽次數(shù):309次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

dGTP 溶液,100mM0.5mL說明書運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細(xì)介紹

dGTP 溶液,100mM0.5mL說明書產(chǎn)品及特點(diǎn):

本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長(zhǎng) cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶,內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長(zhǎng)可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。

dGTP 溶液,100mM0.5mL說明書合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)R坏?RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長(zhǎng)度成反比。 RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對(duì)富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對(duì)照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標(biāo)記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測(cè)。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段(如果使用隨機(jī)引物,將出現(xiàn)多個(gè)小片段)。

〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:深紅色或棕色粉末
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲氧基苯胺鈉鹽
〖英文名稱〗:ADPS;N-Ethyl-N-(3-sulfopropyl)-3-methoxyaniline sodium salt
〖CAS號(hào)〗:82611-88-9
C12H18NO4SNa=295.33
〖級(jí)別〗:BR
純度:≥99%
摩爾吸收系數(shù):≥8200(λmax255nm)
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:白色結(jié)晶粉末
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)新型Trinder's試劑是高水溶性苯胺衍生物,被廣泛用于診斷檢測(cè)和生化試驗(yàn)。在比色法測(cè)定過氧化輕活性中比常規(guī)生色的試劑具有若干優(yōu)勢(shì)。新型Trinder's試劑足夠穩(wěn)定,既可以用于溶液也可以用于試驗(yàn)流水線檢測(cè)系統(tǒng)中。在過氧化輕和過氧化物酶的存在下,新型Trinder's試劑在與4-氨基* (4-AA) 或3-甲基苯并噻唑砜腙(MBTH) 的氧化偶合反應(yīng)過程中,形成非常穩(wěn)定的紫色或藍(lán)色染料。與MBTH偶合染料的摩爾吸光度比與4-AA偶合染料的高1.5-2倍;然而,4-AA溶液比MBTH溶液更穩(wěn)定。底物被其氧化酶酶促氧化產(chǎn)生過氧化輕。該過氧化輕的濃度對(duì)應(yīng)于底物濃度。因此,可通過氧化偶合反應(yīng)的顯色測(cè)定底物的量。葡萄糖、酒精、酰基-*和*可以用于檢測(cè)與新型Trinder's試劑及4-AA偶合的那些底物。現(xiàn)有10種新型Trinder's試劑。在新型Trinder's試劑中,TOOS是zui常用的。然而,對(duì)于特定的底物,試驗(yàn)不同種類的新型Trinder's試劑對(duì)開發(fā)的檢測(cè)系統(tǒng)是必需的
〖保存〗:2~8℃
3,3'5,5'-四甲基聯(lián)苯胺丙磺酸鈉

葡萄糖 -6- 磷酸二鈉    弗氏不*佐劑
異丙基 -β-D- 硫代半乳糖苷    DH10B 感受態(tài)細(xì)胞
鄰硝基苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷    XL2-Blue 感受態(tài)細(xì)胞
葡聚糖凝膠 G-75 中顆粒    BL21-CodonPlus(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞
S1 核酸酶    Rosetta 感受態(tài)細(xì)胞
β -瓊脂糖酶    AGL1 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞
透明質(zhì)酸酶    EHA105 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞
吸附樹脂 XAD7    GV3101 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞
D- 果糖 -1,6- 二*    LBA4404 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞
*    AH109 酵母感受態(tài)細(xì)胞
熒光胺    EGY48 酵母感受態(tài)細(xì)胞
萘啶酮酸    NMY51 酵母感受態(tài)細(xì)胞
彈性蛋白酶 ( 豬胰 )    Y187 酵母感受態(tài)細(xì)胞
CR 試劑盒


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