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上海邦景實業有限公司
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dTTP 溶液,2.5mM2mL實驗步驟運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。
dTTP 溶液,2.5mM2mL實驗步驟合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
dTTP 溶液,2.5mM2mL實驗步驟按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
〖其他名稱〗:4-芐氨基-7-硝基苯并-2-氧雜-1,3-二唑;4-芐基氨基-7-硝基苯并-2-氧雜-1,3-二唑
〖CAS號〗:18378-20-6
C13H10N4O3=270.25
〖級別〗:BR
〖含量〗:≥98%
〖熔點〗:206~209℃
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:棕色粉末
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)蛋白質熒光探針
〖保存〗:2~8℃,避光
4-氨基-3-肼基-5-巰基-1,2,4-三氮唑
〖英文名稱〗:AHMT;4-Amino-3-hydrazi,2,4-triazol-5-thiol;4-Amino-3-hydrazino-5-mercapto-1,2,4-triazole;Purpald
〖其他名稱〗:4-氨基聯基巰基-1,2,4-三氮雜茂;4-氨基-3-肼-5-巰基-1,2,4-三唑;4-氨基-3-肼基-5-巰基-1.2.4-三唑;4-氨基-3-聯氨-5-巰基-1.2.4三氮雜茂;4-氨基-5-肼基-1,2,4-三唑-3-硫醇
〖CAS號〗:1750-12-5
C2H6N6S=146.17
〖級別〗:AR
抗壞血酸 PCNA 小鼠單抗
胸腺嘧啶核苷 PCNA 小鼠單抗
D- * VDAC1 小鼠單抗
兔肌動蛋白 VDAC1 小鼠單抗
L- 羥基* COX IV 小鼠單抗
亮綠 SF( 淡黃 ) COX IV 小鼠單抗
噻苯隆 小鼠抗 Trx 標簽蛋白單抗
蘇木色精 小鼠抗 Trx 標簽蛋白單抗
姬姆色素染料 兔抗山羊 IgG(H+L),辣根過氧化物酶標記
* 山羊抗小鼠 IgG(H+L),異硫氰酸熒光素標記
* 山羊抗小鼠 IgG(H+L),異硫氰酸熒光素標記
激動素 山羊抗兔 IgG(H+L),異硫氰酸熒光素標記
黃吸頭 ( 盒裝 )
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