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行業(yè)產(chǎn)品

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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司


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dTTP 溶液,2.5mM2mL實(shí)驗(yàn)步驟

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

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更新時(shí)間:2017-01-19 14:08:04瀏覽次數(shù):186次

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產(chǎn)品簡介

dTTP 溶液,2.5mM2mL實(shí)驗(yàn)步驟運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細(xì)介紹

dTTP 溶液,2.5mM2mL實(shí)驗(yàn)步驟合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)R坏?RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
dTTP 溶液,2.5mM2mL實(shí)驗(yàn)步驟按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標(biāo)記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段(如果使用隨機(jī)引物,將出現(xiàn)多個(gè)小片段)。

產(chǎn)品介紹:
產(chǎn)品及特點(diǎn):

本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶,內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。

〖其他名稱〗:4-芐氨基-7-硝基苯并-2-氧雜-1,3-二唑;4-芐基氨基-7-硝基苯并-2-氧雜-1,3-二唑
〖CAS號(hào)〗:18378-20-6
C13H10N4O3=270.25
〖級(jí)別〗:BR
〖含量〗:≥98%
〖熔點(diǎn)〗:206~209℃
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:棕色粉末
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)蛋白質(zhì)熒光探針
〖保存〗:2~8℃,避光
4-氨基-3-肼基-5-巰基-1,2,4-三氮唑
〖英文名稱〗:AHMT;4-Amino-3-hydrazi,2,4-triazol-5-thiol;4-Amino-3-hydrazino-5-mercapto-1,2,4-triazole;Purpald
〖其他名稱〗:4-氨基聯(lián)基巰基-1,2,4-三氮雜茂;4-氨基-3-肼-5-巰基-1,2,4-三唑;4-氨基-3-肼基-5-巰基-1.2.4-三唑;4-氨基-3-聯(lián)氨-5-巰基-1.2.4三氮雜茂;4-氨基-5-肼基-1,2,4-三唑-3-硫醇
〖CAS號(hào)〗:1750-12-5
C2H6N6S=146.17
〖級(jí)別〗:AR

抗壞血酸    PCNA 小鼠單抗
胸腺嘧啶核苷    PCNA 小鼠單抗
D- *    VDAC1 小鼠單抗
兔肌動(dòng)蛋白    VDAC1 小鼠單抗
L- 羥基*    COX IV 小鼠單抗
亮綠 SF( 淡黃 )    COX IV 小鼠單抗
噻苯隆    小鼠抗 Trx 標(biāo)簽蛋白單抗 
蘇木色精    小鼠抗 Trx 標(biāo)簽蛋白單抗 
姬姆色素染料    兔抗山羊 IgG(H+L),辣根過氧化物酶標(biāo)記
*    山羊抗小鼠 IgG(H+L),異硫氰酸熒光素標(biāo)記
*    山羊抗小鼠 IgG(H+L),異硫氰酸熒光素標(biāo)記
激動(dòng)素    山羊抗兔 IgG(H+L),異硫氰酸熒光素標(biāo)記
 黃吸頭 ( 盒裝 )


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